মূল পার্থক্য - ক্লোনিং বনাম সাবক্লোনিং
ক্লোনিং এবং সাবক্লোনিং হল আণবিক জৈবিক প্রক্রিয়া যা জেনেটিকালি অভিন্ন কোষ বা ডিএনএ বা জিন বহনকারী জীব তৈরি করে যা আগ্রহের বিষয়। ক্লোনিং হল একটি কৌশল যার মধ্যে একটি ভেক্টরে আগ্রহী জিন বা ডিএনএ সন্নিবেশ করা, হোস্ট ব্যাকটেরিয়ামের মধ্যে এটির প্রতিলিপি করা এবং জেনেটিক মেকআপের সঠিক অনুলিপি কোষ বা জীবের উত্পাদন জড়িত। সাবক্লোনিং হল এমন একটি কৌশল যাতে আগ্রহের জিন সন্নিবেশ করা হয়, যা ইতিমধ্যেই একটি ভেক্টরে, একটি গৌণ ভেক্টরে প্রবেশ করানো হয়, একটি হোস্ট ব্যাকটেরিয়ামের মধ্যে এটির প্রতিলিপি তৈরি করা হয় এবং কোষ বা জীবের জেনেটিকালি অভিন্ন কপি তৈরি করা হয়।ক্লোনিং এবং সাবক্লোনিং-এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল, ক্লোনিং-এ, আগ্রহের জিন, একবার ভেক্টরে আটকে গেলে, ক্লোনিং প্রক্রিয়া চালিয়ে যায় যখন, সাবক্লোনিং-এ, আগ্রহের ইতিমধ্যে ক্লোন করা জিনটি প্যারেন্ট ভেক্টর থেকে আলাদা করা হয় এবং আবার ঢোকানো হয় একটি প্রাপক ভেক্টর এবং প্রক্রিয়া চালিয়ে যান৷
ক্লোনিং কি?
ক্লোনিং এমন একটি পদ্ধতি যা জেনেটিকালি অভিন্ন জীব বা কোষ তৈরি করে। প্রকৃতিতে, অযৌন প্রজননের মাধ্যমে ক্লোনিং ঘটে। যখন কোন জেনেটিক পুনর্মিলন বা পরিবর্তন হয় না, তখন কন্যা কোষগুলি পিতামাতার একই জেনেটিক মেকআপ গ্রহণ করে। প্রোক্যারিওটিক এবং ইউক্যারিওটিক জীবগুলি বাইনারি ফিশন, বাডিং, মাইটোসিস ইত্যাদির মাধ্যমে ক্লোন তৈরি করে। আণবিক জীববিজ্ঞানে, ডিএনএ-এর নির্দিষ্ট অংশের গঠন এবং কার্যকারিতা অধ্যয়নের জন্য আণবিক জীববিজ্ঞানে ক্লোনিং একটি জনপ্রিয় পদ্ধতি।
আণবিক ক্লোনিংয়ের মূল উদ্দেশ্য হল জিনগতভাবে অভিন্ন কোষ বা জীবের লক্ষ লক্ষ কপি তৈরি করা যা আগ্রহের ডিএনএ খণ্ড (প্রধানত জিন) বহন করে।এটি অন্যের সঠিক জেনেটিক কপি সহ জীব তৈরি করে। প্রাথমিকভাবে, কাঠামোগত এবং কার্যকরী তথ্য পেতে এবং ডিএনএ সিকোয়েন্সিংয়ের জন্য আণবিক গবেষণায় নির্দিষ্ট জিনগুলিকে ক্লোন করা হয়। এছাড়াও, বৃহৎ পরিসরে নির্দিষ্ট প্রোটিন বা পণ্য উৎপাদনের জন্য, ক্লোনিং ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
ক্লোনিং পদ্ধতি
ক্লোনিং পদ্ধতির প্রাথমিক ধাপগুলো নিম্নরূপ।
- আগ্রহের জিন সনাক্তকরণ এবং বিচ্ছিন্নকরণ। (পিসিআর দ্বারা আগ্রহের জিনের পরিবর্ধন)।
- আগ্রহের জিনের হজমের সীমাবদ্ধতা (সীমাবদ্ধতা এন্ডোনিউক্লিজ জিন কেটে দেয়)।
- ভেক্টর ডিএনএ-এর হজমের সীমাবদ্ধতা। (ভেক্টর ডিএনএ একই সীমাবদ্ধতা এন্ডোনিউক্লিজ ব্যবহার করে কাটা হয়)।
- ভেক্টরে জিনের সন্নিবেশ এবং রিকম্বিন্যান্ট অণু গঠন।
- রিকম্বিন্যান্ট ভেক্টরের একটি হোস্ট ব্যাকটেরিয়ামে রূপান্তর।
- রূপান্তরিত ব্যাকটেরিয়া বিচ্ছিন্নকরণ এবং সনাক্তকরণ (প্লাজমিড ভেক্টরে একটি নির্বাচনযোগ্য জিন থাকা উচিত, সাধারণত একটি অ্যান্টিবায়োটিক প্রতিরোধী জিন স্ক্রিন রূপান্তরিত ব্যাকটেরিয়া)।
- হোস্টের মধ্যে রিকম্বিন্যান্ট জিনের অভিব্যক্তি।
চিত্র_01: ক্লোনিং পদ্ধতি
সাবক্লোনিং কি?
সাবক্লোনিং হল জিনের পছন্দসই কার্যকারিতা অর্জনের জন্য জিনের অভিব্যক্তি দেখার জন্য আগ্রহের একটি জিনকে এক ভেক্টর থেকে অন্য ভেক্টরে সরানোর একটি পদ্ধতি। এই পদ্ধতিতে, দুটি ভেক্টর জড়িত; যথা, প্যারেন্ট ভেক্টর এবং গন্তব্য ভেক্টর। সাবক্লোনিং-এ ক্লোন করা সন্নিবেশগুলি আবার দ্বিতীয় ভেক্টরে সরানো হয়। প্রথম ভেক্টর থেকে দ্বিতীয় ভেক্টরে জিন স্থানান্তর করার উদ্দেশ্য হল এমন কিছু প্রাপ্ত করা যা প্রথম ভেক্টর দ্বারা করা সম্ভব হয়নি বা ডিএনএর ইতিমধ্যে ক্লোন করা খণ্ডের মধ্যে আবার একটি জিন আলাদা করা এবং এটিকে প্রকাশ করা। শুরুতে এই পদ্ধতিতে সীমাবদ্ধতা এনজাইম ব্যবহার করা হয়।
সাবক্লোনিং পদ্ধতি
সাবক্লোনিংয়ের প্রাথমিক ধাপগুলো নিম্নরূপ।
- সীমাবদ্ধ এন্ডোনিউক্লিজের সাহায্যে, দাতা প্লাজমিডের (অভিভাবক ভেক্টর) আগ্রহের ডিএনএ পৃথক করা।
- পিসিআর ব্যবহার করে আগ্রহের ডিএনএ এর পরিবর্ধন।
- জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা পিসিআর পণ্যের বিশুদ্ধকরণ (আগ্রহের ডিএনএ)।
- পিতৃ প্লাজমিডের আগ্রহের ডিএনএ আলাদা করতে ব্যবহৃত একই সীমাবদ্ধতা দ্বারা প্রাপক প্লাজমিড খোলা।
- সাবক্লোনড প্লাজমিড তৈরি করতে প্রাপকের প্লাজমিডের মধ্যে আগ্রহের ডিএনএ (জিন) এর লিগেশন।
- সাবক্লোনড ভেক্টরের একটি উপযুক্ত হোস্ট ব্যাকটেরিয়ায় রূপান্তর।
- রূপান্তরিত কোষের স্ক্রীনিং।
- প্লাজমিড ডিএনএ বিশুদ্ধকরণ এবং পছন্দসই পণ্যগুলি পেতে জিনের ডিএনএ সিকোয়েন্সিং বা প্রকাশের জন্য ব্যবহার।
সাবক্লোনিং করা হয় জিনের ক্লোন করা গ্রুপ থেকে একটি জিনকে বিচ্ছিন্ন করার সময় বা যখন আগ্রহের জিনটিকে একটি দরকারী প্লাজমিডে স্থানান্তর করতে হয় যাতে আগ্রহের জিনের সঠিক কার্যকারিতা দেখতে হয়।
চিত্র_02: সাবক্লোনিং পদ্ধতি
ক্লোনিং এবং সাবক্লোনিংয়ের মধ্যে পার্থক্য কী?
ক্লোনিং বনাম সাবক্লোনিং |
|
| ক্লোনিং এমন একটি পদ্ধতি যা জেনেটিকালি অভিন্ন জীব বা কোষ তৈরি করে। | সাবক্লোনিং হল জিনের পছন্দসই কার্যকারিতা অর্জনের জন্য জিনের অভিব্যক্তি দেখার জন্য আগ্রহের একটি জিনকে এক ভেক্টর থেকে অন্য ভেক্টরে স্থানান্তর করার একটি পদ্ধতি। |
| প্রক্রিয়া | |
| জীব থেকে আগ্রহের ডিএনএ আলাদা করুন এবং একটি ভেক্টরে একবার প্রবেশ করান এবং ক্লোন করুন | ইতিমধ্যে ক্লোন করা ডিএনএকে প্রথম ভেক্টর থেকে আলাদা করে দ্বিতীয় ভেক্টরে ঢুকিয়ে ক্লোন করা হয়েছে। |
| ভেক্টরের মাধ্যমে মুভমেন্ট সন্নিবেশ করুন | |
| এক ভেক্টর থেকে অন্য ভেক্টরে সন্নিবেশ (আগ্রহের ডিএনএ) স্থানান্তরিত করে না। | অভিভাবক ভেক্টর থেকে গন্তব্য ভেক্টরে সন্নিবেশগুলি সরান৷ |
সারাংশ – ক্লোনিং বনাম সাবক্লোনিং
ক্লোনিং আগ্রহের সন্নিবেশিত জিন বা ডিএনএ সহ জেনেটিকালি অভিন্ন কোষ বা জীব তৈরি করে। এটি একটি হোস্ট ব্যাকটেরিয়ামের মধ্যে একটি ভেক্টর এবং অভিব্যক্তিতে আগ্রহের ডিএনএ বিচ্ছেদ এবং সন্নিবেশের মাধ্যমে এগিয়ে যায়। সাবক্লোনিং ক্লোনিংয়ের সাথে অনুরূপ পদক্ষেপগুলি ভাগ করে। যাইহোক, সাবক্লোনিং-এ, ইতিমধ্যে ক্লোন করা ডিএনএ খণ্ড (আগ্রহের জিন) একটি ভেক্টরে ঢোকানো হয় এবং একটি হোস্ট ব্যাকটেরিয়ায় রূপান্তরিত হয়। এটাই ক্লোনিং এবং সাবক্লোনিংয়ের মধ্যে মূল পার্থক্য।
