বিপরীত ফেজ এবং স্বাভাবিক ফেজ HPLC এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে বিপরীত ফেজ HPLC একটি ননপোলার স্থির ফেজ এবং একটি পোলার মোবাইল ফেজ ব্যবহার করে যেখানে সাধারণ ফেজ HPLC একটি পোলার স্থির ফেজ এবং একটি কম পোলার মোবাইল ফেজ ব্যবহার করে।
স্বাভাবিক পর্যায় HPLC হল HPLC-এর প্রাচীনতম কৌশল যা Tswett তার উদ্ভিদের নির্যাস পৃথকীকরণে ব্যবহার করেছিল; তিনি একটি কাচের কলামে চক ব্যবহার করেছিলেন। এটি ছিল ক্রোমাটোগ্রাফির শাস্ত্রীয় মোড যা এটিকে "স্বাভাবিক" কৌশল হিসাবে নামকরণ করে। অন্যদিকে, বিপরীতমুখী এইচপিএলসি হল স্বাভাবিক কৌশলের বিপরীত, যা বিজ্ঞানীরা সম্প্রতি তৈরি করেছেন।
রিভার্স ফেজ HPLC কি?
রিভার্স ফেজ HPLC হল একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল যেখানে আমরা একটি হাইড্রোফোবিক স্থির ফেজ ব্যবহার করি। সমস্ত এইচপিএলসি পদ্ধতির মধ্যে, আমরা এই পদ্ধতিটি প্রায় 70% এর জন্য ব্যবহার করি কারণ এর বিস্তৃত প্রযোজ্যতা এবং প্রজননযোগ্যতা। স্থির পর্যায়টি ননপোলার এবং মোবাইল ফেজটি মেরু।
অধিকাংশ সময়ে, বিজ্ঞানীরা মোবাইল ফেজ হিসাবে অ্যাসিটোনিট্রাইল বা মিথানলের মতো মিসসিবল, পোলার জৈব দ্রাবক সহ জলের মিশ্রণ ব্যবহার করেন। অতএব, বিশ্লেষকরা ননপোলার স্থির পর্যায়ের সাথে যোগাযোগ করে।
সাধারণ ফেজ HPLC কি?
স্বাভাবিক ফেজ HPLC হল একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল যেখানে আমরা একটি হাইড্রোফিলিক স্থির ফেজ ব্যবহার করি। এটি HPLC-এর ঐতিহ্যগত পদ্ধতি, যদিও আমরা এটি তেমন ব্যবহার করি না। স্থির পর্যায়টি মেরু, এবং মোবাইল পর্যায়টি অপোলার। আরও গুরুত্বপূর্ণ, এই প্রযুক্তির মোবাইল ফেজটি 100% জৈব। মানে এর জন্য কোন পানি ব্যবহার করা হয় না।
চিত্র 01: অ্যানালাইটের উপাদানগুলির পোলারিটি অনুসারে স্বাভাবিক ফেজ এবং রিভার্স ফেজ HPLC ক্রোমাটোগ্রামের জন্য একটি নমুনা প্রোফাইল৷
সাধারণত, স্থির ধাপে সিলিকা, সায়ানো, ডিওল, অ্যামিনো বন্ডেড ফেজ ইত্যাদি থাকে। মোবাইল ফেজগুলির মধ্যে জৈব দ্রাবক যেমন হেক্সেন, ইথাইল অ্যাসিটেট ইত্যাদি অন্তর্ভুক্ত থাকে। মেরু স্থির পর্যায়।
রিভার্স ফেজ এবং সাধারণ ফেজ HPLC-এর মধ্যে পার্থক্য কী?
রিভার্স ফেজ HPLC হল একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল যেখানে আমরা একটি হাইড্রোফোবিক স্থির ফেজ ব্যবহার করি। এই কৌশলটির স্থির পর্যায়টি ননপোলার এবং মোবাইল ফেজটি মেরু। তদুপরি, বিজ্ঞানীরা একটি মিসসিবল, পোলার জৈব দ্রাবক, যেমন অ্যাসিটোনিট্রিল বা মিথানলের বিপরীতে HPLC-এ মোবাইল ফেজ হিসাবে জলের মিশ্রণ ব্যবহার করেন।বিপরীতে, সাধারণ ফেজ HPLC হল একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল যেখানে আমরা একটি হাইড্রোফিলিক স্থির ফেজ ব্যবহার করি। এই কৌশলটির স্থির পর্যায়টি মেরু এবং মোবাইল ফেজটি ননপোলার। তা ছাড়াও, বিজ্ঞানীরা জৈব দ্রাবক যেমন হেক্সেন, ইথাইল অ্যাসিটেট ইত্যাদি সাধারণ ফেজ HPLC-এর মোবাইল ফেজ হিসেবে ব্যবহার করেন। নীচের ইনফোগ্রাফিকটি একটি সারণী আকারে বিপরীত ফেজ এবং সাধারণ ফেজ HPLC এর মধ্যে পার্থক্য উপস্থাপন করে৷
সারাংশ – রিভার্স ফেজ বনাম সাধারণ ফেজ HPLC
রিভার্স ফেজ এবং সাধারণ ফেজ HPLC কৌশল দুটি তরল ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল। বিপরীত ফেজ এবং স্বাভাবিক ফেজ HPLC এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে বিপরীত ফেজ HPLC একটি ননপোলার স্থির ফেজ এবং একটি পোলার মোবাইল ফেজ ব্যবহার করে যেখানে সাধারণ ফেজ HPLC একটি পোলার স্থির ফেজ এবং একটি কম পোলার মোবাইল ফেজ ব্যবহার করে।
