এলিসা এবং এলিস্পটের মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে এলিসা হল একটি এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা সিক্রেটেড সিগন্যালিং প্রোটিনের মোট ঘনত্ব নির্ধারণ করে, অন্যদিকে এলিস্পট হল একটি এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা পৃথক সাইটোকাইন-সিক্রেটিং কোষ সনাক্ত করে৷
Elisa এবং Elispot হল দুটি এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা ওষুধ, উদ্ভিদ রোগবিদ্যা, জৈবপ্রযুক্তি এবং বিভিন্ন ফার্মাসিউটিক্যাল শিল্পে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। এই কৌশলগুলিতে, একটি প্রোটিন বিশ্লেষক এটির বিরুদ্ধে নির্দেশিত একটি অ্যান্টিবডি দ্বারা সনাক্ত করা হয়। এলিসা হল সবচেয়ে জনপ্রিয় এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা পরীক্ষাগারে ব্যবহৃত হয়। অন্যদিকে, এলিস্পট একটি এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা এলিসার পরিবর্তে ব্যবহার করা হয় না বরং পরীক্ষাগারে এলিসা ছাড়াও ব্যবহৃত হয়।
এলিসা অ্যাসে কি?
এলিসা হল একটি এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা সিক্রেটেড সিগন্যালিং প্রোটিনের মোট ঘনত্ব নির্ধারণ করে। এটি একটি বহুল ব্যবহৃত বিশ্লেষণাত্মক জৈব রসায়ন পরীক্ষা যা প্রথম 1971 সালে Engvall এবং Perlmann দ্বারা বর্ণনা করা হয়েছিল। এই কৌশলটি এই নির্দিষ্ট প্রোটিনের বিরুদ্ধে নির্দেশিত অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে একটি তরল নমুনায় একটি নির্দিষ্ট প্রোটিনের উপস্থিতি সনাক্ত করতে একটি কঠিন-ফেজ ধরনের এনজাইম ইমিউনোসে ব্যবহার করে। এই পরীক্ষাটি মেডিসিন, প্ল্যান্ট প্যাথলজি এবং বায়োটেকনোলজিতে একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত ডায়গনিস্টিক টুল।
ELISA পরীক্ষার প্রক্রিয়া
অধিকাংশ ELISA পরীক্ষায়, একটি অজানা পরিমাণ অ্যান্টিজেন শুরুতে একটি কঠিন সাপোর্টে (মাইক্রোলিটার প্লেট) স্থির থাকে। তারপর মিলিত প্রাথমিক অ্যান্টিবডি কঠিন সমর্থন পৃষ্ঠের উপর প্রয়োগ করা হয়। এই অ্যান্টিবডি অ্যান্টিজেন (অ্যান্টিজেন-অ্যান্টিবডি কমপ্লেক্স) এর সাথে একটি জটিল গঠন করে। অ্যান্টিজেন আবদ্ধ প্রাথমিক অ্যান্টিবডি একটি সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি দ্বারা সনাক্ত করা যেতে পারে যা বায়োকনজুগেশনের মাধ্যমে একটি এনজাইমের সাথে যুক্ত।এলিসা পরীক্ষার চূড়ান্ত ধাপে, এনজাইমের সাবস্ট্রেট ধারণকারী একটি পদার্থ যোগ করা হয়। যদি অ্যান্টিজেনের সাথে প্রাথমিক অ্যান্টিবডির যথাযথ আবদ্ধতা থাকে, তাহলে সাবস্ট্রেট দ্বারা একটি সনাক্তযোগ্য রঙ পরিবর্তন হয়। শেষ পর্যন্ত, এটি নমুনায় অ্যান্টিজেনের পরিমাণ নির্ধারণ করে।
চিত্র 01: এলিসার বিভিন্ন প্রকার
এছাড়াও, এলিসার জন্য বিভিন্ন পদ্ধতি রয়েছে, যেমন প্রত্যক্ষ এলিসা এবং পরোক্ষ এলিসা। বর্তমানে, মাইকোব্যাকটেরিয়াম যক্ষ্মা, রোটাভাইরাস, হেপাটাইটিস বি ভাইরাস, হেপাটাইটিস সি ভাইরাস, এন্টারোটক্সিন উৎপাদনকারী ই.কোলি, এইচআইভি এবং SARS-CoV-2 এর মতো মানব রোগজীবাণু সনাক্ত করতে বিভিন্ন এলিসা পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়।
এলিস্পট অ্যাস কি?
Elispot হল একটি এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা পৃথক সাইটোকাইন-নিঃসৃত কোষ সনাক্ত করে। Cecil Czerkinsky প্রথম ELISpot বর্ণনা করেন 1983 সালে।এটি এমন এক ধরণের পরীক্ষা যা একটি একক কোষের জন্য সাইটোকাইন নিঃসরণের ফ্রিকোয়েন্সি পরিমাণগতভাবে পরিমাপের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে। এটি একটি কৌশল হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয় যা একটি জৈবিক বা রাসায়নিক প্রোটিন বিশ্লেষক সনাক্ত করতে অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে। ফ্লুরোস্পট অ্যাস হল এলিস্পট অ্যাসয়ের একটি ভিন্নতা, যা একাধিক অ্যানালাইট (আরো গোপনীয় প্রোটিন) বিশ্লেষণ করতে ফ্লুরোসেন্স ব্যবহার করে।
এলিস্পট পরীক্ষার প্রক্রিয়া
এই পদ্ধতিতে, সাইটোকাইন নির্দিষ্ট মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলি প্রাথমিকভাবে মাইক্রোলিটার প্লেটের কূপে যোগ করা হয়। তারপরে পর্যবেক্ষণ করা পছন্দসই কোষগুলি কূপে যুক্ত করা হয়। পরে, কোষগুলি ইনকিউবেট হয়। কোষের ইনকিউবেশনের সময়, কোষগুলিকে যেকোনো উদ্দীপনায় প্রতিক্রিয়া জানাতে এবং সাইটোকাইন নিঃসরণ করার অনুমতি দেওয়া হয়। ইনকিউবেটেড কোষ দ্বারা নিঃসৃত সাইটোকাইনগুলি অ্যান্টিবডিগুলির সাথে সংযুক্ত হবে কারণ কোষগুলি সাইটোকাইন নির্দিষ্ট মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি দ্বারা বেষ্টিত থাকে৷
চিত্র 02: এলিস্পট অ্যাসে
এই সাইটোকাইন নির্দিষ্ট মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলি সনাক্ত করতে, বায়োটিনিলেটেড নির্দিষ্ট সনাক্তকরণ অ্যান্টিবডিগুলি কূপে যুক্ত করা হয়। বায়োটিনিলেটেড নির্দিষ্ট সনাক্তকরণ অ্যান্টিবডিগুলি কূপের মধ্যে সাইটোকাইন নির্দিষ্ট মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলিকে ক্যাপচার করে। অধিকন্তু, সনাক্তকরণ অ্যান্টিবডিগুলির সাথে আবদ্ধ করার জন্য স্ট্রেপ্টাভিডিন-এনজাইম কনজুগেটগুলি কূপের সাথে যুক্ত করা হয়। চূড়ান্ত ধাপে, নির্দিষ্ট সাবস্ট্রেটগুলি কূপে যোগ করা হয়। এনজাইম কনজুগেট এবং সাবস্ট্রেটের প্রতিক্রিয়া কূপের মধ্যে স্বতন্ত্র দাগ তৈরি করে। এই স্বতন্ত্র দাগগুলি একটি স্বয়ংক্রিয় ELISpot রিডারে পড়া হয়। শেষ পর্যন্ত, এটি সাইটোকাইন নিঃসরণের ফ্রিকোয়েন্সি আরও গণনা করবে।
এলিসা এবং এলিস্পটের মধ্যে মিল কী?
- এগুলি উভয়ই এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাসেস।
- উভয় অ্যাসেই নির্দিষ্ট প্রোটিন বিশ্লেষক সনাক্ত করে।
- এই অ্যাসগুলি প্রোটিন বিশ্লেষক সনাক্ত করতে নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে।
- উভয় অ্যাসেই এনজাইম এবং সাবস্ট্রেট ব্যবহার করে।
- এগুলি চিকিৎসা পরীক্ষাগারে একটি ডায়াগনস্টিক টুল হিসাবে ব্যবহৃত হয়।
এলিসা এবং এলিস্পটের মধ্যে পার্থক্য কী?
এলিসা হল একটি এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা সিক্রেটেড সিগন্যালিং প্রোটিনের মোট ঘনত্ব নির্ধারণ করে। অন্যদিকে, এলিস্পট হল একটি এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা পৃথক সাইটোকাইন নিঃসৃত কোষ পরিমাপ করে। সুতরাং, এটি এলিসা এবং এলিস্পটের মধ্যে মূল পার্থক্য। তদুপরি, এলিসা পরীক্ষায়, অ্যান্টিজেনটি প্রথমে মাইক্রোলিটার কূপে স্থির হয়ে যায়। বিপরীতে, এলিস্পট পরীক্ষায়, অ্যান্টিবডিটি প্রথমে মাইক্রোলিটার কূপে স্থির হয়ে যায়। সুতরাং, এটি এলিসা এবং এলিস্পটের মধ্যে আরেকটি পার্থক্য।
নীচের ইনফোগ্রাফিকটি টেবিল আকারে এলিসা এবং এলিস্পটের মধ্যে পার্থক্যের একটি বিশদ বিশ্লেষণ উপস্থাপন করে৷
সারাংশ – এলিসা বনাম এলিস্পট
এলিসা এবং এলিস্পট হল দুটি এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস যা ওষুধ, উদ্ভিদ রোগবিদ্যা, জৈবপ্রযুক্তি এবং বিভিন্ন ফার্মাসিউটিক্যাল শিল্পে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। এলিসা একটি তরল নমুনায় লিগ্যান্ডের (প্রোটিন) উপস্থিতি সনাক্ত করে যা পরিমাপের জন্য লিগ্যান্ডের বিরুদ্ধে নির্দেশিত অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে। এলিস্পট অ্যাস ইমিউন প্রতিক্রিয়া নিরীক্ষণের জন্য একটি বহুল ব্যবহৃত পদ্ধতি। এটি অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে পৃথক সাইটোকাইন ক্ষরণকারী কোষ সনাক্ত করে। এটি একটি ইমিউনোসে এবং বায়োসাই কৌশল উভয়ই। সুতরাং, এটি এলিসা এবং এলিস্পটের মধ্যে পার্থক্যের সারাংশ।
