ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিংয়ের মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে ক্রোমাটোফোকাসিং হল এক ধরনের কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি পদ্ধতি যা আয়ন বিনিময় রজন ব্যবহার করে যখন আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিং হল এক ধরনের ইলেক্ট্রোফোরসিস কৌশল যা অচলিত pH গ্রেডিয়েন্ট জেল ব্যবহার করে৷
ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিং এমন দুটি কৌশল যা তাদের আইসোইলেকট্রিক পয়েন্ট অনুযায়ী প্রোটিনকে আলাদা করে। ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিং উভয়েরই দুর্দান্ত সমাধান করার ক্ষমতা রয়েছে। ক্রোমাটোফোকাসিং একটি উচ্চ-রেজোলিউশন কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি পদ্ধতি যেখানে আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিং একটি ইলেক্ট্রোফোরেটিক বিভাজন পদ্ধতি।অধিকন্তু, ক্রোমাটোফোকাসিং একটি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্র ব্যবহার করে না যখন আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিংয়ের জন্য একটি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রের প্রয়োজন হয়৷
ক্রোমাটোফোকাসিং কি?
ক্রোমাটোফোকাসিং হল এক ধরনের উচ্চ ইলিউশন ক্রোমাটোগ্রাফি যা প্রোটিনকে তাদের আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্টের পার্থক্য অনুসারে আলাদা করে। এটি একটি আয়ন বিনিময় রজন কলাম এবং একটি অভ্যন্তরীণভাবে উন্নত pH গ্রেডিয়েন্ট ব্যবহার করে। আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিংয়ের বিপরীতে, ক্রোমাটোফোকাসিং একটি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রকে জড়িত করে না। ক্রোমাটোফোকাসিং হল একটি শক্তিশালী পরিশোধন কৌশল যা অত্যন্ত অনুরূপ অণুগুলিকে সমাধান করতে পারে এমনকি শুধুমাত্র 0.02 pH ইউনিট দ্বারা পৃথক। অতএব, ক্রোমাটোফোকাসিং একটি চূড়ান্ত পলিশিং পদক্ষেপ হিসাবে সবচেয়ে উপযুক্ত যখন খুব অনুরূপ উপাদানগুলিকে আলাদা করার জন্য উচ্চ রেজোলিউশনের প্রয়োজন হয়৷
ক্রোমাটোফোকাসিং-এ, নমুনাটি স্টার্ট বাফারের সাথে মিশ্রিত করে কলামে প্রয়োগ করা হয়। যে প্রোটিনগুলি তাদের আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্টের উপরে pH-এ থাকে সেগুলি নেতিবাচকভাবে চার্জ করা হয় এবং তারা কলামের উপরের দিকে থাকে যখন অন্যান্য প্রোটিনগুলি যেগুলি তাদের আইসোইলেকট্রিক পয়েন্টের নীচে pH-এ থাকে, তারা কলামের নীচে স্থানান্তরিত হয়।সর্বোচ্চ আইসোইলেকট্রিক পয়েন্টের প্রোটিনটি প্রথমে বিলুপ্ত হয় যখন সর্বনিম্ন আইসোইলেকট্রিক পয়েন্টের প্রোটিনটি কলাম থেকে শেষ পর্যন্ত বিলুপ্ত হয়। এই কৌশলটি প্রোটিন বৃষ্টিপাত এবং পিএইচ গ্রেডিয়েন্টের রৈখিকতার মতো বিভিন্ন কারণ দ্বারা প্রভাবিত হয়।
আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিং কি?
আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিং এমন একটি কৌশল যা বিভিন্ন অণুকে তাদের আইসোইলেকট্রিক পয়েন্টের উপর ভিত্তি করে আলাদা করে। এটি ইলেক্ট্রোফোকাসিং নামেও পরিচিত। এই কৌশলটি প্রায়শই জেলে প্রোটিন বিভাজনের জন্য ব্যবহৃত হয়। আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিংয়ে, নমুনাটি অচলিত পিএইচ গ্রেডিয়েন্ট (আইপিজি) জেলে যুক্ত করা হয়। আইপিজি জেল হল পিএইচ গ্রেডিয়েন্ট সহ একটি অ্যাক্রিলামাইড জেল ম্যাট্রিক্স কপোলিমারাইজড। প্রোটিনগুলি ক্যাথোডের দিকে স্থানান্তরিত হয় যতক্ষণ না তারা তাদের আইসোইলেকট্রিক পয়েন্টগুলির pH অঞ্চল খুঁজে পায়। যখন একটি প্রোটিন pH এ পৌঁছায় যার কোন নেট চার্জ নেই, তখন স্থানান্তর বন্ধ হয়ে যায় এবং একটি স্থির ব্যান্ড দেয়। একইভাবে, প্রতিটি প্রোটিন পিএইচ গ্রেডিয়েন্টের একটি বিন্দুতে তার আইসোইলেকট্রিক পয়েন্টের সাথে সম্পর্কিত একটি ব্যান্ড দেয়।
চিত্র 01: আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিং
আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিং দ্বি-মাত্রিক জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের প্রথম ধাপ। সেই কৌশলে, প্রোটিনগুলিকে প্রথমে তাদের আইসোইলেকট্রিক পয়েন্ট অনুসারে আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিং দ্বারা আলাদা করা হয় এবং তারপর SDS-PAGE এর মাধ্যমে তাদের আণবিক ওজন দ্বারা আলাদা করা হয়।
ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিংয়ের মধ্যে মিল কী?
- ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিং দুটি অত্যন্ত সমাধানকারী পদ্ধতি।
- দুটিই প্রোটিনের আইসোইলেক্ট্রিক বিন্দুর উপর ভিত্তি করে।
- এই কৌশলগুলি পিএইচ গ্রেডিয়েন্ট ব্যবহার করে।
- মানুষের হিমোগ্লোবিনের বৈচিত্র্যের বৈশিষ্ট্যের জন্য উভয় পদ্ধতিই তথ্যপূর্ণ।
- এরা অণুগুলি সমাধান করতে পারে যেখানে পিআই মানগুলি 0.02 পিএইচ ইউনিটের মতো আলাদা হয়৷
ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিংয়ের মধ্যে পার্থক্য কী?
ক্রোমাটোফোকাসিং হল একটি উচ্চ-রেজোলিউশন কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি কৌশল যা প্রোটিনকে তাদের আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্ট অনুযায়ী আলাদা করে। বিপরীতে, আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিং হল একটি ইলেক্ট্রোফোরেটিক কৌশল যা কৈশিকের মধ্যে গঠিত পিএইচ গ্রেডিয়েন্ট বরাবর বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রের প্রয়োগের মাধ্যমে তাদের আইসোইলেকট্রিক পয়েন্ট অনুসারে প্রোটিনগুলিকে পৃথক করে। সুতরাং, এটি ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিংয়ের মধ্যে মূল পার্থক্য।
ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিংয়ের মধ্যে আরেকটি পার্থক্য হল যে ক্রোমাটোফোকাসিং একটি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রকে জড়িত করে না যখন আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিংয়ের জন্য একটি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রের প্রয়োজন হয়৷
সারাংশ – ক্রোমাটোফোকাসিং বনাম আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিং
ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিং দুটি অনুরূপ কৌশল যার মধ্যে অণুর উচ্চ মীমাংসা ক্ষমতা রয়েছে, বিশেষত খুব অনুরূপ অণু। ক্রোমাটোফোকাসিং একটি উচ্চ-রেজোলিউশন কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি কৌশল যখন আইসোইলেকট্রিক ফোকাসিং একটি ইলেক্ট্রোফোরসিস পদ্ধতি। আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিংয়ের বিপরীতে ক্রোমাটোফোকাসিং একটি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রকে জড়িত করে না। সুতরাং, এটি ক্রোমাটোফোকাসিং এবং আইসোইলেক্ট্রিক ফোকাসিংয়ের মধ্যে পার্থক্যকে সংক্ষিপ্ত করে৷
