GFP এবং EGFP-এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল GFP হল একটি বন্য ধরনের প্রোটিন যা অ-স্তন্যপায়ী কোষগুলির আণবিক ক্লোনিংয়ে অন্তর্ভুক্ত করা হয় যখন EGFP হল একটি উন্নত বা প্রকৌশলী GFP যা স্তন্যপায়ী কোষে ব্যবহার করা যেতে পারে।.
আণবিক ক্লোনিং হল একটি উন্নত কৌশল যা বিজ্ঞানীরা রিকম্বিন্যান্ট প্রযুক্তির মাধ্যমে প্রোটিন প্রকাশে ব্যাপকভাবে ব্যবহার করেন। রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তিতে, রিকম্বিন্যান্ট ভেক্টরকে সফলভাবে হোস্ট জীবে রূপান্তর করা প্রয়োজন। অতএব, রূপান্তর প্রক্রিয়া চলাকালীন, এটি সনাক্ত করা উচিত এবং নিশ্চিত করা উচিত যে আগ্রহের জিনটি হোস্টে রূপান্তরিত হয়েছে কিনা। এটি মূল্যায়ন করার জন্য, আণবিক জীববিজ্ঞানীরা বিভিন্ন কৌশল অবলম্বন করেন।এই কৌশলগুলির মধ্যে একটি হল রিপোর্টার জিন। এই রিপোর্টার জিন সঠিক ট্রান্সফরম্যান্ট নির্বাচন করতে নির্বাচনযোগ্য মার্কার হিসাবে কাজ করে। এইভাবে, গ্রিন ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন (GFP) এবং এনহ্যান্সড গ্রীন ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন (EGFP) হল দুটি রিপোর্টার প্রোটিন যা আণবিক ক্লোনিংয়ে ব্যবহৃত হয়৷
GFP কি?
GFP হল একটি বন্য ধরনের প্রোটিন যাতে রয়েছে 238টি অ্যামিনো অ্যাসিডের অবশিষ্টাংশ এবং অ্যামিনো অ্যাসিড সিকোয়েন্সের বেশ কয়েকটি নির্বাচনযোগ্য অঞ্চল যা এটিকে অন্যান্য ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন থেকে আলাদা করে। অধিকন্তু, এই বন্য ধরনের প্রোটিনটি মূলত অ্যাকোরিয়া ভিক্টোরিয়া থেকে বিচ্ছিন্ন ছিল; এক ধরনের জেলিফিশ। যাইহোক, প্রাকৃতিক ঘটনাতে, জেলিফিশ নির্দিষ্ট উদ্দীপনার প্রতিক্রিয়ায় সবুজ রঙের প্রতিপ্রভ তৈরি করতে সক্ষম হয়েছিল।
আগে, এই ধারণাটি বিজ্ঞানীদের বিস্মিত করেছিল এবং তারা তাদের রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তিতে এটি ব্যবহার করার সিদ্ধান্ত নিয়েছিল। ফলস্বরূপ, বিজ্ঞানীরা তাদের জিন এক্সপ্রেশন স্টাডিতে রিপোর্টার জিন হিসাবে বন্য-টাইপ জিনের এই মিউট্যান্ট ফর্মটি ব্যবহার করেছেন। জিএফপি-এর বন্য-প্রকার জিনটি এমন একটি প্রোটিন তৈরি করতে সক্ষম যা ঘরের তাপমাত্রায় বা অতিবেগুনী রশ্মির অধীনে ফ্লুরোসেন্স দেয়।অতএব, ট্রান্সফরম্যান্টের মধ্যে ঢোকানো হলে, এটি প্রকাশ করে এবং ফ্লুরোসেন্স তৈরি করে। রূপান্তর প্রক্রিয়ার পরে যদি ফ্লুরোসেন্সের ফলাফল হয় তবে এটি রূপান্তর প্রক্রিয়ার সাফল্য নিশ্চিত করে। সহজ কথায়, ফ্লুরোসেন্স নির্গমন ভেক্টরের সফল রূপান্তরের সংকেত দেয় যা হোস্টে আগ্রহের জিন বহন করে।
চিত্র 01: GFP
এই কারণে, জিএফপি জিনের প্রকাশের একটি ইন ভিভো মার্কার হিসাবে কাজ করে। বর্তমানে, জিএফপি উৎপাদনের জন্য জেনেটিক ইঞ্জিনিয়ারিং কৌশল ব্যবহার করা হচ্ছে। এছাড়াও, GFP-এর অনেক উন্নত সংস্করণ যেমন EGFP পাওয়া যায়। তাই, এটি আণবিক ক্লোনিং এবং জিন এক্সপ্রেশন স্টাডিতে GFP-এর দক্ষ ব্যবহার সক্ষম করে৷
EGFP কি?
এনহ্যান্সড গ্রিন ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন বা EGFP হল GFP এর একটি উন্নত সংস্করণ।সহজ কথায়, আমরা EGFP কে ওয়াইল্ড-টাইপ GFP-এর একটি প্রকৌশলী সংস্করণ হিসাবে সংজ্ঞায়িত করতে পারি। যখন জিএফপি-এর বন্য-প্রকার জিন পরিবর্তিত হয়, তখন এটি উপকারী প্রভাব তৈরি করে। সুতরাং, GFP-এর পরিবর্তিত জিন নতুন অক্ষর প্রকাশের অনুমতি দেয় এবং এর ফলস্বরূপ, আমরা উন্নত বৈশিষ্ট্যগুলির সাথে উন্নত GFP তৈরি করতে পারি। উপরন্তু, আমরা বিকিরণ বা রাসায়নিক পদ্ধতি ব্যবহার করে বন্য-টাইপ জিএফপি জিনে সফলভাবে মিউটেশনগুলি প্রবর্তন করতে পারি। এই পরিবর্তিত জিনগুলি তখন EGFP তৈরি করে, যার আরও উপকারী বৈশিষ্ট্য রয়েছে৷
চিত্র 02: EGFP
EGFP এর উন্নত বৈশিষ্ট্যগুলি নিম্নরূপ;
- শক্তিশালী ফ্লুরোসেন্স সংকেত নির্গত করতে সক্ষম।
- উচ্চ সংবেদনশীলতা রয়েছে।
- প্রোকারিওট এবং অন্যান্য নিম্ন স্তরের ইউক্যারিওটের পরিবর্তে স্তন্যপায়ী কোষে এটি ব্যবহার করতে পারেন।
- এছাড়াও, পণ্যের বর্ধিত বিশুদ্ধতা প্রদান করে।
অতএব, GFP এর তুলনায়, EGFP হল জিন এক্সপ্রেশন স্টাডির জন্য পছন্দের পছন্দ। তবে, জিএফপির তুলনায় পণ্যটির দাম বেশি।
GFP এবং EGFP-এর মধ্যে মিল কী?
- GFP এবং EGFP দুটি প্রোটিন যা সবুজ বর্ণ নির্গত করার ক্ষমতা রাখে
- অতএব, উভয়ই জিন এক্সপ্রেশন স্টাডিতে রিপোর্টার প্রোটিন হিসেবে কাজ করে।
- এছাড়াও, রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তি ব্যবহার করে উভয়ই সংশ্লেষণ করা সম্ভব।
- এছাড়াও, উন্নত ফর্মগুলিকে সংশ্লেষিত করতে এই দুটি প্রকারকে আরও পরিবর্তন করা সহজ৷
GFP এবং EGFP-এর মধ্যে পার্থক্য কী?
প্রতিবেদক জিন হল একটি জিন যা রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তিতে আগ্রহের জিনের সাথে সংযুক্ত থাকে। এটি হোস্টে রিকম্বিন্যান্ট ভেক্টরের সফল রূপান্তরের সংকেত দেয়।এখানে, GFP এবং EGFP হল দুটি ধরণের সবুজ ফ্লোরসেন্ট প্রোটিন যা রিপোর্টার প্রোটিন হিসাবে কাজ করে। যাইহোক, GFP এবং EGFP-এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল GFP একটি বন্য-প্রকার যখন EGFP হল GFP-এর একটি প্রকৌশলী সংস্করণ। তদ্ব্যতীত, EGFP-এর GFP এর চেয়ে বেশি উপকারী বৈশিষ্ট্য রয়েছে। উদাহরণস্বরূপ, EGFP শক্তিশালী ফ্লুরোসেন্ট আলো তৈরি করে এবং GFP এর চেয়ে বেশি সংবেদনশীল। GFP এবং EGFP এর মধ্যে আরেকটি পার্থক্য হল যে সিস্টেমে আমরা এইগুলি ব্যবহার করতে পারি। অ-স্তন্যপায়ী সিস্টেমগুলি GFP ব্যবহার করে যখন স্তন্যপায়ী সিস্টেমগুলি EGFP ব্যবহার করে৷
নীচের ইনফোগ্রাফিকটি সারণী আকারে GFP এবং EGFP-এর মধ্যে পার্থক্য উপস্থাপন করে৷
সারাংশ – GFP বনাম EGFP
GFP এবং EGFP হল আণবিক ক্লোনিং এবং জিন এক্সপ্রেশন স্টাডিতে রিপোর্টার প্রোটিন। জিএফপি হ'ল বন্য ধরণের প্রোটিন, যা একটি সবুজ ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন।প্রোটিনটি প্রাথমিকভাবে জেলিফিশ অ্যাকোরিয়া ভিক্টোরিয়া থেকে বিচ্ছিন্ন ছিল। বিপরীতে, EFGP হল GFP প্রোটিনের একটি বর্ধিত রূপ। এটি উন্নত বৈশিষ্ট্য সহ বন্য-প্রকারের একটি মিউট্যান্ট। তাই, EFGP-এর উচ্চতর সংকেত শক্তি এবং উচ্চ সংবেদনশীলতা রয়েছে। অতএব, আমরা এটি স্তন্যপায়ী ভেক্টরগুলিতে ব্যবহার করতে পারি। বিপরীতে, GFP এর ব্যবহার প্রধানত শুধুমাত্র অ-স্তন্যপায়ী ভেক্টরের উপর। সর্বোপরি, এটি GFP এবং EGFP এর মধ্যে পার্থক্য।
