মূল পার্থক্য - পিসিআর বনাম ডিএনএ প্রতিলিপি
ডিএনএ প্রতিলিপি একটি প্রাকৃতিক প্রক্রিয়া যা জীবন্ত প্রাণীর মধ্যে ঘটে। এটি একটি ডিএনএ অণুর দুটি অভিন্ন অনুলিপি উত্পাদন জড়িত। ডিএনএ প্রতিলিপি জৈবিক উত্তরাধিকারের একটি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ প্রক্রিয়া। জিনগত তথ্য মূলত ডিএনএ প্রতিলিপির ক্ষমতার কারণে পিতামাতা থেকে সন্তানদের কাছে প্রেরণ করা হয়। সুতরাং, এটি একটি অপরিহার্য প্রক্রিয়া যা প্রায় সমস্ত জীবন্ত প্রাণীর মধ্যে ঘটে। এই প্রক্রিয়াটি ভিভোতে ঘটে। যাইহোক, ডিএনএ প্রতিলিপি ইন ভিট্রো পদ্ধতির মাধ্যমেও করা যেতে পারে। পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (পিসিআর) হল ডিএনএ রেপ্লিকেশনের একটি ইন ভিট্রো পদ্ধতি। পিসিআর একটি ডিএনএ পরিবর্ধন পদ্ধতি যা পরীক্ষাগারে সঞ্চালিত হয়।এটি একটি আগ্রহী ডিএনএ খণ্ড বা একটি জিন থেকে হাজার হাজার থেকে লক্ষ লক্ষ কপি ডিএনএ তৈরি করে। ভিভো ডিএনএ প্রতিলিপি এবং পিসিআর-এর মধ্যে পার্থক্য রয়েছে। এই দুটির মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে পিসিআর একটি পিসিআর মেশিনে রক্ষণাবেক্ষণের তাপমাত্রায় ডিএনএর একটি বড় সংখ্যক অনুলিপি তৈরি করার জন্য সঞ্চালিত হয় যখন ডিএনএ প্রতিলিপি শরীরের তাপমাত্রায় একটি একক ডিএনএ অণুর দুটি অভিন্ন অনুলিপি তৈরি করতে শরীরের ভিতরে ঘটে।
PCR কি?
পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (পিসিআর) হল একটি ইন ভিট্রো ডিএনএ পরিবর্ধন কৌশল যা নিয়মিতভাবে আণবিক জৈবিক পরীক্ষাগারে সঞ্চালিত হয়। এই পদ্ধতিটি বিশেষভাবে আগ্রহী ডিএনএ খণ্ডের হাজার হাজার থেকে লক্ষ লক্ষ কপি তৈরি করতে সক্ষম করে। পিসিআর 1980 সালে ক্যারি মুলিস দ্বারা প্রবর্তন করা হয়েছিল। এই কৌশলটিতে, ডিএনএর আগ্রহী খণ্ডটি অনুলিপি তৈরির জন্য টেমপ্লেট হিসাবে পরিবেশন করা হয়। টাক পলিমারেজ নামক এনজাইমটি ডিএনএ পলিমারেজ এনজাইম হিসাবে ব্যবহৃত হয় এবং এটি ডিএনএ খণ্ডের নতুন স্ট্র্যান্ডের সংশ্লেষণকে অনুঘটক করবে।PCR মিশ্রণে থাকা প্রাইমারগুলি ফ্র্যাগমেন্ট এক্সটেনশনের শুরুর পয়েন্ট হিসাবে কাজ করবে। পিসিআর প্রতিক্রিয়া শেষে, নমুনা ডিএনএ-এর অনেক কপি পাওয়া যাবে।
পিসিআর মিশ্রণে ডিএনএর কপি তৈরির জন্য প্রয়োজনীয় সমস্ত উপাদান অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছে। সেগুলি হল নমুনা ডিএনএ, ডিএনএ পলিমারেজ (টাক পলিমারেজ), প্রাইমার (ফরওয়ার্ড এবং রিভার্স প্রাইমার), নিউক্লিওটাইডস (ডিএনএর বিল্ডিং ব্লক) এবং একটি বাফার। পিসিআর প্রতিক্রিয়া একটি পিসিআর মেশিনে চালানো হয় এবং এটি সঠিক পিসিআর মিশ্রণ এবং সঠিক পিসিআর প্রোগ্রাম দিয়ে খাওয়ানো উচিত। প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ এবং প্রোগ্রাম সঠিক হলে, এটি খুব অল্প পরিমাণ ডিএনএ থেকে ডিএনএর একটি নির্দিষ্ট অংশের প্রয়োজনীয় পরিমাণ কপি তৈরি করবে।
পিসিআর বিক্রিয়ায় তিনটি প্রধান ধাপ জড়িত থাকে যথা বিকৃতকরণ, প্রাইমার অ্যানিলিং এবং স্ট্র্যান্ড এক্সটেনশন। এই তিনটি ধাপ তিনটি ভিন্ন তাপমাত্রায় ঘটে। ডিএনএ একটি ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড হেলিক্স হিসাবে বিদ্যমান। দুটি স্ট্র্যান্ড হাইড্রোজেন বন্ড দ্বারা আবদ্ধ। পরিবর্ধনের পূর্বে, উচ্চ তাপমাত্রা প্রদানের মাধ্যমে ডবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ আলাদা করা হয়।উচ্চ তাপমাত্রায়, ডবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ একক স্ট্র্যান্ডে পরিণত হয়। তারপর প্রাইমারগুলি আগ্রহী খণ্ডের বা ডিএনএ-র জিনগুলির ফ্ল্যাঙ্কিং প্রান্তের সাথে অ্যানিল করে। প্রাইমার হল সিঙ্গেল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ-এর একটি ছোট টুকরো যা টার্গেট সিকোয়েন্সের প্রান্তের পরিপূরক। ফরোয়ার্ড এবং রিভার্স প্রাইমারগুলি অ্যানিলিং তাপমাত্রায় বিকৃত নমুনা ডিএনএ-এর ফ্ল্যাঙ্কিং প্রান্তে পরিপূরক বেসগুলির সাথে অ্যানিল করে৷
যখন প্রাইমারগুলি ডিএনএ-এর সাথে সংযুক্ত করা হয়, তখন Taq পলিমারেজ এনজাইম টেমপ্লেট ডিএনএর পরিপূরক নিউক্লিওটাইডগুলি যুক্ত করে নতুন স্ট্র্যান্ডের সংশ্লেষণ শুরু করে। Taq পলিমারেজ হল একটি তাপ স্থিতিশীল এনজাইম যা থার্মাস অ্যাকুয়াটিকাস নামক একটি থার্মোফিলিক ব্যাকটেরিয়া থেকে বিচ্ছিন্ন। PCR বাফার Taq পলিমারেজ কর্মের জন্য সর্বোত্তম অবস্থা বজায় রাখে। পিসিআর বিক্রিয়ার এই তিনটি পর্যায় পিসিআর পণ্যের প্রয়োজনীয় পরিমাণ উত্পাদন করতে পুনরাবৃত্তি হয়। প্রতিটি পিসিআর প্রতিক্রিয়ায়, ডিএনএ কপির সংখ্যা দ্বিগুণ হচ্ছে। সুতরাং, পিসিআর-এ একটি সূচকীয় পরিবর্ধন লক্ষ্য করা যেতে পারে।জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস ব্যবহার করে পিসিআর পণ্যটি পর্যবেক্ষণ করা যেতে পারে কারণ এটি একটি জেলে দৃশ্যমান পরিমাণে ডিএনএ তৈরি করে এবং এটি সিকোয়েন্সিং ইত্যাদির মতো আরও গবেষণার জন্য বিশুদ্ধ করা যেতে পারে।
চিত্র 01: PCR
PCR চিকিৎসা ও জৈবিক গবেষণায় একটি মূল্যবান হাতিয়ার। বিশেষ করে ফরেনসিক স্টাডিতে, পিসিআর-এর একটি অপরিসীম মূল্য রয়েছে কারণ এটি অপরাধীদের ক্ষুদ্র নমুনা থেকে অধ্যয়নের জন্য ডিএনএ প্রশস্ত করতে পারে এবং ফরেনসিক ডিএনএ প্রোফাইল তৈরি করতে পারে। জিনোটাইপিং, জিন ক্লোনিং, মিউটেশন সনাক্তকরণ, ডিএনএ সিকোয়েন্সিং, ডিএনএ মাইক্রোয়ারে এবং পিতৃত্ব পরীক্ষা ইত্যাদি সহ আণবিক জীববিজ্ঞানের অনেক ক্ষেত্রে পিসিআর ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
DNA প্রতিলিপি কি?
ডিএনএ প্রতিলিপি একটি ডিএনএ অণু থেকে ডিএনএর দুটি অভিন্ন অনুলিপি তৈরি করার প্রক্রিয়াটিকে উল্লেখ করা হয়। এটি জৈবিক উত্তরাধিকারের একটি গুরুত্বপূর্ণ প্রক্রিয়া।ডিএনএ প্রতিলিপি সমস্ত জীবন্ত প্রাণীর মধ্যে ঘটে। কন্যা কোষে জিনোম হস্তান্তর করার জন্য পিতামাতার কোষের জিনোমের প্রতিলিপি করা উচিত। ডিএনএ প্রতিলিপি প্রক্রিয়ার তিনটি প্রধান ধাপ রয়েছে যার নাম সূচনা, প্রসারণ এবং সমাপ্তি। এই পদক্ষেপগুলি বিভিন্ন এনজাইম দ্বারা অনুঘটক করা হয়। ডিএনএ প্রতিলিপি কোষের জিনোমে প্রতিলিপির উত্স নামক অবস্থান থেকে শুরু হয়। জিনোমে, ডিএনএ ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড আকারে বিদ্যমান। এই দুটি স্ট্র্যান্ড ডিএনএ প্রতিলিপির শুরুতে আলাদা করা হয় এবং এটি এটিপি নির্ভর ডিএনএ হেলিকেস দ্বারা সম্পন্ন হয়। DNA এর unwinding হল প্রধান ঘটনা যা দীক্ষা ধাপে ঘটে। টেমপ্লেট হিসাবে বিচ্ছিন্ন ডিএনএ স্ট্র্যান্ডগুলি ব্যবহার করে, ডিএনএ পলিমারেজ টেমপ্লেট স্ট্র্যান্ডের নতুন পরিপূরক স্ট্র্যান্ডগুলিকে 5’ থেকে 3’ দিকের দিকে সংশ্লেষিত করে। এই ধাপটিকে প্রসারণ বলা হয়। সমাপ্তি ঘটে যখন দুটি প্রতিলিপির কাঁটা পিতামাতার ক্রোমোজোমের বিপরীত প্রান্তে একে অপরের সাথে মিলিত হয়।
চিত্র 02: ডিএনএ প্রতিলিপি
ডিএনএ পলিমারেজ ছাড়াও, ডিএনএ প্রাইমেজ, ডিএনএ হেলিকেস, ডিএনএ লিগেজ এবং টপোইসোমারেজের মতো বেশ কয়েকটি এনজাইম ডিএনএ প্রতিলিপির সাথে জড়িত। ইন ভিভো ডিএনএ রেপ্লিকেশনের একটি বিশেষ বৈশিষ্ট্য হল এটি ওকাজাকি টুকরা তৈরি করে। একটি স্ট্র্যান্ড ক্রমাগত গঠিত হয় এবং অন্যটি ছোট ছোট টুকরোতে তৈরি হয়।
পিসিআর এবং ডিএনএ প্রতিলিপির মধ্যে মিল কী?
- পিসিআর এবং ডিএনএ উভয় প্রতিলিপিতে, ডবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ একে অপরের থেকে পৃথক করা হয়।
- পিসিআর এবং ডিএনএ প্রতিলিপি উভয় প্রক্রিয়াতেই, ডিএনএ অনুলিপি করা হয়।
- পিসিআর এবং ডিএনএ প্রতিলিপি প্রক্রিয়া উভয়ই সত্যিই গুরুত্বপূর্ণ৷
- পিসিআর এবং ডিএনএ প্রতিলিপি উভয় প্রক্রিয়াতেই, ডিএনএ পলিমারেজ এনজাইম জড়িত।
পিসিআর এবং ডিএনএ প্রতিলিপির মধ্যে পার্থক্য কী?
পিসিআর বনাম ডিএনএ প্রতিলিপি |
|
| পিসিআর হল ডিএনএ পরিবর্ধনের একটি ইন ভিট্রো পদ্ধতি যাতে ডিএনএর হাজার হাজার থেকে লক্ষ লক্ষ কপি তৈরি হয়৷ | ডিএনএ প্রতিলিপি একটি প্রাকৃতিক প্রক্রিয়া যা একটি ডিএনএ অণু থেকে ডিএনএর দুটি অভিন্ন অনুলিপি তৈরি করে। |
| ধাপ | |
| PCR এর তিনটি ধাপ রয়েছে; ডিনাচুরেশন, প্রাইমার অ্যানিলিং এবং স্ট্র্যান্ড এক্সটেনশন। | DNA প্রতিলিপির তিনটি ধাপ রয়েছে; দীক্ষা, প্রসারণ এবং সমাপ্তি৷ |
| প্রাইমারের সম্পৃক্ততা | |
| PCR এর জন্য কৃত্রিম প্রাইমার প্রয়োজন। | DNA প্রতিলিপির জন্য কৃত্রিম প্রাইমারের প্রয়োজন হয় না। RNA এর একটি ছোট অংশ DNA প্রতিলিপিতে জড়িত। |
| ডবল-স্ট্র্যান্ডের বিকৃতকরণ | |
| পিসিআর-এ উচ্চ তাপমাত্রা প্রয়োগ করে ডাবল স্ট্র্যান্ড আলাদা করা হয়। | ডিএনএ প্রতিলিপিতে এনজাইম ডিএনএ হেলিকেস দ্বারা ডাবল স্ট্র্যান্ডগুলি একে অপরের থেকে পৃথক করা হয়। |
| এনজাইম জড়িত | |
| PCR Taq পলিমারেজ ব্যবহার করে। | DNA রেপ্লিকেশন ডিএনএ পলিমারেজ ব্যবহার করে। |
| তাপমাত্রা | |
| পিসিআর একটি মেশিনের ভিতরে তিনটি ভিন্ন তাপমাত্রায় ঘটে। | ডিএনএ প্রতিলিপি জীবের শরীরের মধ্যে শরীরের তাপমাত্রায় ঘটে। |
| ভিভো বা ইন ভিট্রো | |
| পিসিআর একটি ইন ভিট্রো পদ্ধতি। | DNA রেপ্লিকেশন একটি ইন ভিভো পদ্ধতি। |
সারাংশ – পিসিআর বনাম ডিএনএ প্রতিলিপি
ডিএনএ প্রতিলিপি একটি একক ডিএনএ অণু থেকে ডিএনএর দুটি অভিন্ন অনুলিপি তৈরি করার একটি প্রক্রিয়া। এটি সমস্ত জীবন্ত প্রাণীর মধ্যে ঘটে কারণ এটি পিতামাতা থেকে বংশধরদের জেনেটিক তথ্য দেওয়ার একটি পদ্ধতি সরবরাহ করে। এটি তিনটি এনজাইম্যাটিকভাবে অনুঘটক পদক্ষেপ নিয়ে গঠিত যেমন দীক্ষা, প্রসারণ এবং সমাপ্তি। ল্যাবে কৃত্রিমভাবে ডিএনএ রেপ্লিকেশন করা যায়। পিসিআর হল আগ্রহী ডিএনএ থেকে প্রচুর পরিমাণে ডিএনএর কপি তৈরি করার একটি উপায়। পিসিআর নিয়মিতভাবে আণবিক জৈবিক পরীক্ষাগারে সঞ্চালিত হয় কারণ এটি ডিএনএর কপি তৈরির একটি সহজ পদ্ধতি। এটি হল পিসিআর এবং ডিএনএ প্রতিলিপির মধ্যে পার্থক্য।
