মূল পার্থক্য - গ্রাম স্টেন বনাম অ্যাসিড ফাস্ট
ব্যাকটেরিয়া খুবই ক্ষুদ্র অণুজীব। এগুলি স্বচ্ছ, এবং জীবিত এবং অস্থির অবস্থায় তাদের সনাক্তকরণ কঠিন। এইভাবে, ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের সুবিধার্থে বিভিন্ন স্টেনিং পদ্ধতি তৈরি করা হয়। তিনটি প্রধান ধরণের স্টেনিং কৌশল রয়েছে: সাধারণ স্টেনিং, ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং এবং স্ট্রাকচারাল স্টেনিং। ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং এমন একটি কৌশল যা ব্যাকটেরিয়াকে আলাদা করতে একাধিক দাগ ব্যবহার করে। গ্রাম দাগ এবং অ্যাসিড-দ্রুত দাগ সবচেয়ে জনপ্রিয় ডিফারেনশিয়াল দাগ হিসাবে পরিচিত। গ্রাম স্টেনিং হল একটি ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং কৌশল, যা ব্যাকটেরিয়াকে গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া এবং গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া নামে দুটি গ্রুপে বিভক্ত করে।অ্যাসিড-দ্রুত দাগ হল একটি ডিফারেনশিয়াল দাগ যা অ্যাসিড-দ্রুত জীব যেমন মাইকোব্যাকটেরিয়াম অ-অ্যাসিড দ্রুত জীব থেকে সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়। এটি গ্রাম দাগ এবং অ্যাসিড ফাস্ট স্টেনের মধ্যে মূল পার্থক্য।
গ্রামের দাগ কি?
গ্রাম দাগ হল একটি গুরুত্বপূর্ণ ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং কৌশল যা মাইক্রোবায়োলজিতে ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়। 1884 সালে ডেনিশ ব্যাক্টেরিওলজিস্ট হ্যান্স ক্রিশ্চিয়ান গ্রাম এই কৌশলটি চালু করেছিলেন। গ্রাম স্টেনিং ব্যাকটেরিয়াকে গ্রাম পজিটিভ এবং গ্রাম নেগেটিভ নামে দুটি প্রধান গ্রুপে শ্রেণীবদ্ধ করে, যা ব্যাকটেরিয়ার শ্রেণীবিভাগ এবং সনাক্তকরণে অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। মাইক্রোবায়োলজিস্টরা তাদের গবেষণার সময় ব্যাকটেরিয়া চরিত্রায়নের প্রাথমিক ধাপ হিসেবে গ্রাম স্টেনিং করে থাকেন।
ব্যাকটেরিয়া তাদের কোষ প্রাচীরের পার্থক্যের উপর ভিত্তি করে গ্রুপ করা হয়। গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া তাদের কোষ প্রাচীরের একটি পুরু পেপ্টিডোগ্লাইকান স্তর দ্বারা গঠিত যখন গ্রাম নেতিবাচক ব্যাকটেরিয়া তাদের কোষ প্রাচীরের একটি পাতলা পেপ্টিডোগ্লাইকান স্তর দ্বারা গঠিত। গ্রাম স্টেনিংয়ের ফলাফল কোষ প্রাচীরের পেপ্টিডোগ্লাইকান স্তরের পুরুত্বের পার্থক্যের উপর ভিত্তি করে হবে।
গ্রাম স্টেনিং চারটি ভিন্ন বিকারক ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়; প্রাথমিক দাগ, মর্ডান্ট, বিবর্ণ এজেন্ট এবং পাল্টা দাগ। ক্রিস্টাল ভায়োলেট এবং সাফরানিন যথাক্রমে প্রাথমিক এবং পাল্টা দাগ হিসাবে ব্যবহৃত হয়, যেখানে গ্রাম আয়োডিন এবং 95% অ্যালকোহল যথাক্রমে মর্ডেন্ট এবং ডিকলোরাইজার হিসাবে ব্যবহৃত হয়। গ্রাম দাগের প্রাথমিক ধাপগুলি নিম্নরূপ;
- একটি ব্যাকটেরিয়াল স্মিয়ার একটি পরিষ্কার কাচের স্লাইডে প্রস্তুত করা হয়, তাপ স্থির করে ঠান্ডা করা হয়৷
- স্মিয়ার 1 - 2 মিনিটের জন্য ক্রিস্টাল ভায়োলেটে প্লাবিত হয়৷
- অতিরিক্ত দাগ অপসারণের জন্য ধীরগতির কলের জল দিয়ে স্মিয়ার ধুয়ে ফেলা হয়।
- গ্রাম আয়োডিন ১ মিনিটের জন্য স্মিয়ারে প্রয়োগ করা হয়।
- স্মিয়ার ধীর গতির কলের জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়
- স্মিয়ার 95% অ্যালকোহল দিয়ে 2 - 5 সেকেন্ডের জন্য ধুয়ে ফেলা হয় এবং ধীর গতিতে চলমান কলের জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়৷
- স্মিয়ার ১ মিনিটের জন্য সাফরানিন দিয়ে পাল্টা দাগ দেওয়া হয়
- স্মিয়ার ধীর গতিতে চলমান কলের জল দিয়ে ধুয়ে শুকানো হয় এবং মাইক্রোস্কোপের নীচে পর্যবেক্ষণ করা হয়।
গ্রামের দাগের শেষে, গ্রাম নেতিবাচক ব্যাকটেরিয়া গোলাপী রঙে পরিলক্ষিত হবে এবং গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া বেগুনি রঙে পরিলক্ষিত হবে।
চিত্র 01: গ্রাম নেগেটিভ এবং গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া
গ্রাম দাগের ফলাফল তাদের কোষ প্রাচীরের পেপ্টিডোগ্লাইকান স্তরের পুরুত্ব দ্বারা নির্ধারিত হয়। বিবর্ণকরণের ধাপের সময়, প্রাথমিক দাগ এবং মর্ডেন্ট গ্রাম নেতিবাচক ব্যাকটেরিয়া থেকে সহজেই সরানো হয় এবং বর্ণহীন হয়ে যায় কারণ তাদের একটি পাতলা পেপ্টিডোগ্লাইকান স্তর থাকে। গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়ায় প্রাথমিক দাগ ধরে রাখা হয় কারণ তাদের একটি পুরু পেপ্টিডোগ্লাইকান স্তর থাকে। প্রাথমিক দাগ ধরে রাখার কারণে গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়ার জন্য পাল্টা দাগ কার্যকর হবে না। সুতরাং, গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া প্রাথমিক দাগের রঙে, অর্থাৎ বেগুনি রঙে দৃশ্যমান হবে।পাল্টা দাগ গ্রাম নেতিবাচক ব্যাকটেরিয়াকে দাগ দেবে, এবং তারা পিক রঙে দৃশ্যমান হবে, যা সাফরানিন রঙ। তাই, গ্রাম দাগ দ্বারা ব্যাকটেরিয়াকে দুটি গ্রুপে শ্রেণীবদ্ধ করা সহজ এবং ব্যাকটেরিয়ার পার্থক্য এবং সনাক্তকরণে এটি মূল্যবান।
অ্যাসিড ফাস্ট কি?
অ্যাসিড-ফাস্টনেস নির্দিষ্ট ব্যাকটেরিয়ার একটি শারীরিক সম্পত্তি, বিশেষ করে স্টেনিং পদ্ধতির সময় অ্যাসিড দ্বারা বিবর্ণকরণের বিরুদ্ধে তাদের প্রতিরোধ। একবার দাগ হয়ে গেলে, এই জীবগুলি পাতলা অ্যাসিড এবং বা ইথানল ভিত্তিক বিবর্ণকরণ পদ্ধতিগুলিকে প্রতিরোধ করে যা অনেকগুলি স্টেনিং প্রোটোকলগুলিতে সাধারণ। এইভাবে, "অ্যাসিড ফাস্ট" নামটি সেই জীবগুলিকে দেওয়া হয়। এই বৈশিষ্ট্যটি তাদের কোষের দেয়ালে উচ্চ স্তরের মোমযুক্ত উপাদান (মাইকোলিক অ্যাসিড) থাকার কারণে দেখানো হয়েছে। মাইকোব্যাকটেরিয়াম যক্ষ্মা সনাক্তকরণের জন্য এই পরীক্ষাটি গুরুত্বপূর্ণ৷
চিত্র 2: অ্যাসিড ফাস্ট মাইকোব্যাকটেরিয়া
এই অ্যাসিড ফাস্ট স্টেইনটি 1882 সালে পল এহরলিচ দ্বারা বিকশিত হয়েছিল। এরলিচের অ্যাসিড ফাস্ট কৌশলটি জিহল-নিলসেন দ্বারা পরিবর্তিত হয়েছিল এবং এটি এখন আরও ঘন ঘন ব্যবহার করা হয়। অ্যাসিড দ্রুত স্টেনিং পদ্ধতিতে তিনটি ভিন্ন বিকারক জড়িত। কার্বোল ফুশিন প্রাথমিক দাগ হিসাবে ব্যবহৃত হয়। অ্যাসিড অ্যালকোহল ডিরোলাইজিং এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়। পাল্টা দাগ হিসাবে মিথিলিন ব্লু ব্যবহার করা হয়। স্টেনিং পদ্ধতি নিম্নরূপ সঞ্চালিত হয়.
- প্রাথমিক দাগ (কারবল ফুচসিন) স্লাইডের স্থির নমুনায় প্রয়োগ করা হয় (সমস্ত কোষ লাল রঙে দাগ হবে)।
- স্লাইডটি 5 মিনিটের জন্য স্টিমিং করে গরম করা হয়, যা সঠিকভাবে কোষে দাগগুলিকে চালিত করে।
- তারপর বিবর্ণ দ্রবণ যোগ করা হয় (এটি অ্যাসিড ফাস্ট ব্যাকটেরিয়া ব্যতীত সমস্ত কোষ থেকে লাল ছোপ সরিয়ে দেয়)।
- মিথিলিন নীল একটি পাল্টা দাগ হিসাবে যোগ করা হয় (এটি সমস্ত বিবর্ণ ব্যাকটেরিয়া কোষকে রঙ করে)।
- অ্যাসিড ফাস্ট ব্যাকটেরিয়া লাল থাকে যখন ননসিড ফাস্ট ব্যাকটেরিয়া নীল রঙে দাগ দেয়।
গ্রাম স্টেন এবং অ্যাসিড ফাস্টের মধ্যে মিল কী?
- গ্রামের দাগ এবং অ্যাসিড ফাস্ট দুটি ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং কৌশল।
- উভয় কৌশল ব্যাকটেরিয়াকে দুটি গ্রুপে শ্রেণীবদ্ধ করে।
- উভয় কৌশল দুটি দাগ এবং একটি বিবর্ণকরণ ব্যবহার করে।
গ্রাম দাগ এবং অ্যাসিড ফাস্টের মধ্যে পার্থক্য কী?
গ্রাম স্টেইন বনাম অ্যাসিড ফাস্ট |
|
| গ্রাম স্টেনিং হল একটি ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং কৌশল, যা ব্যাকটেরিয়াকে দুটি গ্রুপে আলাদা করে গ্রাম-পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া এবং গ্রাম-নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া। | অ্যাসিড ফাস্ট স্টেইন হল একটি ডিফারেনশিয়াল দাগ যা অ্যাসিড-ফাস্ট অর্গানিজম থেকে অ-অ্যাসিড-ফাস্ট জীব সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়। |
| প্রাথমিক দাগ | |
| ক্রিস্টাল ভায়োলেট হল গ্রাম দাগের ক্ষেত্রে সাধারণত ব্যবহৃত প্রাথমিক দাগ। | কার্বোল ফুচসিন হল প্রাথমিক দাগ যা অ্যাসিড দ্রুত ব্যবহৃত হয়। |
| ডিরোলাইজিং এজেন্ট | |
| 95% অ্যালকোহল ছোলার দাগের বিবর্ণ এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়। | অ্যাসিড অ্যালকোহল অ্যাসিড দ্রুত ডিকলারাইজিং এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়। |
| কাউন্টার স্টেন | |
| গ্রামের দাগ পাল্টা দাগ হিসেবে সাফরানিন ব্যবহার করে। | অ্যাসিড দ্রুত দাগ পাল্টা দাগ হিসাবে মিথিলিন নীল ব্যবহার করে। |
| পর্যবেক্ষণ | |
| গ্রাম নেতিবাচক ব্যাকটেরিয়া পিক রঙে পরিলক্ষিত হয় এবং গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়া বেগুনি রঙে পরিলক্ষিত হয়। | অ্যাসিড ফাস্ট ব্যাকটেরিয়া লাল রঙে পরিলক্ষিত হয় এবং নন অ্যাসিড ফাস্ট ব্যাকটেরিয়া নীল রঙে পরিলক্ষিত হয়। |
সারাংশ – গ্রাম স্টেইন বনাম অ্যাসিড ফাস্ট
জীবন্ত অবস্থায় অণুজীবের ভিজ্যুয়ালাইজেশন কঠিন। অতএব, জৈবিক দাগ এবং স্টেনিং পদ্ধতিগুলি তাদের বৈশিষ্ট্যগুলি অধ্যয়ন করতে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং হল এক ধরনের স্টেনিং কৌশল যা ব্যাকটেরিয়াকে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়। গ্রাম দাগ এবং অ্যাসিড ফাস্ট স্টেইন দুটি ডিফারেনশিয়াল স্টেনিং কৌশল। গ্রাম স্টেনিং গ্রাম নেগেটিভ ব্যাকটেরিয়া এবং গ্রাম পজিটিভ ব্যাকটেরিয়াকে তাদের কোষের দেয়ালের পুরুত্বের উপর ভিত্তি করে আলাদা করে। অ্যাসিড ফাস্ট স্টেনিং কোষ প্রাচীরের মাইকোলিক অ্যাসিড উপাদানের উপর ভিত্তি করে অ্যাসিড ফাস্ট ব্যাকটেরিয়াকে নন অ্যাসিড ফাস্ট ব্যাকটেরিয়া থেকে আলাদা করে। এটি অ্যাসিড ফাস্ট এবং গ্রাম স্টেনের মধ্যে পার্থক্য।
গ্রাম স্টেন বনাম অ্যাসিড ফাস্টের পিডিএফ সংস্করণ ডাউনলোড করুন
আপনি এই নিবন্ধটির PDF সংস্করণ ডাউনলোড করতে পারেন এবং উদ্ধৃতি নোট অনুসারে অফলাইন উদ্দেশ্যে এটি ব্যবহার করতে পারেন। দয়া করে এখানে পিডিএফ সংস্করণ ডাউনলোড করুন গ্রাম দাগ এবং অ্যাসিড ফাস্টের মধ্যে পার্থক্য।
