বর্ণমিতি এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে কালোরিমেট্রিক অ্যাস একটি দ্রবণে রঙিন যৌগের ঘনত্ব নির্ধারণ করে যখন ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস একটি দ্রবণের গতিপ্রণালী নির্ধারণ করে৷
একটি জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা হল এমন একটি কৌশল যা বিশ্লেষণাত্মকভাবে জৈবিক অণু বা পদার্থের কার্যকলাপ সনাক্ত করে বা পরিমাপ করে। এটি একটি ইন ভিট্রো প্রক্রিয়া। কালোরিমেট্রিক অ্যাস এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস হল দুটি ধরণের সাধারণ জৈব রাসায়নিক অ্যাস যা পরীক্ষাগারগুলিতে করা হয়। ELISA এবং ওয়েস্টার্ন ব্লটিং-এর মতো একাধিক কৌশলও বিপাকীয় কার্যকলাপের পরিমাপ এবং প্রোটিন, এনজাইম এবং অন্যান্য ছোট অণুর মতো জৈব অণুর কার্যকরী আচরণের পরিমাপের জন্য জটিল জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা।প্রোটিন-ডিএনএ, প্রোটিন-আরএনএ এবং প্রোটিন-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া সনাক্তকরণের জন্য এই ধরনের অ্যাস ব্যবহার করা হয়।
বর্ণমিত্রিক পরীক্ষা কি?
একটি কালোরিমেট্রিক অ্যাস একটি কৌশল যা একটি দ্রবণে রঙিন যৌগের ঘনত্ব নির্ধারণ করে। অন্য কথায়, কালোরিমেট্রিক অ্যাস এমন একটি প্রতিক্রিয়া যা বিকারক এবং বিশ্লেষকগুলির মধ্যে একটি এনজাইমেটিক বা রাসায়নিক বিক্রিয়ার কারণে রঙ পরিবর্তনের দিকে পরিচালিত করে। এনজাইম, নির্দিষ্ট যৌগ, হরমোন, অ্যান্টিবডি এবং অন্যান্য বিশ্লেষক পরীক্ষা করার জন্য জৈব রসায়নে কালারমেট্রিক অ্যাসে অনুশীলন করা হয়। তারা কালোরিমিটার বা স্পেকট্রোফটোমিটার ব্যবহার করে। কালারমিটার হল এমন যন্ত্র যা রঙিন নমুনাগুলিকে চিহ্নিত করে রঙের বৈশিষ্ট্যগুলির একটি উদ্দেশ্যমূলক পরিমাপ প্রদান করার জন্য। একটি স্পেকট্রোফটোমিটার এমন একটি ডিভাইস যা আলোর রঙ বা তরঙ্গদৈর্ঘ্যের ফাংশন হিসাবে আলোর তীব্রতা পরিমাপ করে।
চিত্র 01: কালারমেট্রিক অ্যাসে
একটি কালারমিট্রিক অ্যাসে কীভাবে কাজ করে?
একটি বর্ণমিতিক পরীক্ষায়, কূপের সাথে আবদ্ধ একটি নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি দিয়ে একটি প্লেট প্রস্তুত করা হয়। তারপর নমুনা যোগ করা হয়। এটি নমুনাটিকে অ্যান্টিবডির সাথে আবদ্ধ করার অনুমতি দিতে পারে। তারপর সনাক্তকরণ প্রোবের সাথে প্রতিক্রিয়া জানাতে কূপের সাথে একটি সনাক্তকরণ অ্যান্টিবডি এবং একটি সাবস্ট্রেট যুক্ত করা হয়। পড়ার আগে শেষে স্টপ সলিউশন যোগ করা হয়। নমুনা ছাড়া খালি কূপ নামক ফাঁকা রাখা হয়। কালারমেট্রিক অ্যাসে, রঙ যত গাঢ় হবে, বিশ্লেষক ঘনত্ব তত বেশি হবে। সাধারণত, রিডিং নিতে শুধুমাত্র একটি তরঙ্গদৈর্ঘ্য প্রয়োজন। কিন্তু যদি একটি রেফারেন্স পরিমাপ থাকে, তাহলে দুই বা ততোধিক তরঙ্গদৈর্ঘ্য ব্যবহার করা হয়।
ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসে কী?
ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস এমন একটি কৌশল যা এনজাইম বিক্রিয়ার গতিপ্রণালী নির্ধারণ করে। একটি ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস একটি ননফ্লুরোসেন্ট সাবস্ট্রেট বা তদ্বিপরীত থেকে একটি ফ্লুরোসেন্ট পণ্যের গঠনের সাথে সঞ্চালিত হয়।এই পরীক্ষাটি ফ্লুরোসেন্স রেজোন্যান্স এনার্জি ট্রান্সফার (FRET) ব্যবহার করে যেখানে, এনজাইমেটিক বিক্রিয়াটি সাবস্ট্রেটে দুটি ফ্লুরোফোরের অবস্থান পরিবর্তন করে, ফলে ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতা পরিবর্তন হয়।
চিত্র 02: ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসে
ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসেগুলি সাধারণত অন্যান্য অ্যাসেগুলির তুলনায় অনেক বেশি সংবেদনশীল। রোগীদের টিস্যু, কোষ বা তরল নমুনায় ডায়াগনস্টিক এনজাইমের অনুমান এর উচ্চ সংবেদনশীলতার কারণে বৃদ্ধি পায়।
ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসে কীভাবে কাজ করে?
একটি ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসে, প্লেটের নমুনায় একটি সাবস্ট্রেট যোগ করা হয় এবং প্লেট রিডার ব্যবহার করে ফ্লুরোসেন্স প্রতিক্রিয়া নেওয়া হয়। এখানে, প্রতিটি কোষ আলাদাভাবে পরিমাপ করা হয়। অস্বচ্ছ প্লেট ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসে ব্যবহার করা হয়। এটি আলোর বিচ্ছুরণ হ্রাস করে।এই ধরনের পরীক্ষার জন্য দুটি তরঙ্গদৈর্ঘ্য প্রয়োজন। একটি তরঙ্গদৈর্ঘ্য উত্তেজনা সনাক্ত করতে এবং অন্য তরঙ্গদৈর্ঘ্য নির্গমনের জন্য।
কালোরিমেট্রিক এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসের মধ্যে মিল কী?
- বর্ণমিতিক অ্যাস এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস দুই ধরনের জৈব রাসায়নিক অ্যাস।
- উভয় পরীক্ষাই চিকিৎসা নির্ণয়ের জন্য করা হয়।
- এই অ্যাসগুলিতে একটি এনজাইমেটিক প্রতিক্রিয়া জড়িত।
- উভয় অ্যাসেই একটি সাবস্ট্রেট এবং অ্যানালাইটস জড়িত৷
কালোরিমেট্রিক এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসের মধ্যে পার্থক্য কী?
একটি কালোরিমেট্রিক অ্যাস একটি কৌশল যা একটি দ্রবণে রঙিন যৌগের ঘনত্ব নির্ধারণ করে, অন্যদিকে ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস হল একটি কৌশল যা এনজাইম বিক্রিয়ার গতি প্রক্রিয়া নির্ধারণ করে। সুতরাং, এটি কালোরিমেট্রিক এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসের মধ্যে মূল পার্থক্য। অধিকন্তু, ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসগুলি কালারমিট্রিক অ্যাসেগুলির চেয়ে বেশি সংবেদনশীল; এইভাবে, ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসেসের আরও বিশ্লেষক সনাক্ত করার ক্ষমতা রয়েছে।সুতরাং, এটি কালোরিমেট্রিক এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসের মধ্যে আরেকটি গুরুত্বপূর্ণ পার্থক্য। তদুপরি, ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসে দুটি তরঙ্গদৈর্ঘ্যের প্রয়োজন হয়, যখন কালারমিট্রিক অ্যাসে একটি তরঙ্গদৈর্ঘ্যের সাথে সঞ্চালিত হয়।
নীচের ইনফোগ্রাফিকটি কালোরিমেট্রিক এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসের মধ্যে আরও পার্থক্যকে সারণী করে৷
সারাংশ – কালারমিট্রিক বনাম ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসে
একটি জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা হল একটি বিশ্লেষণাত্মক প্রক্রিয়া যা সেলুলার বিপাকীয় প্রতিক্রিয়া নির্ধারণ এবং পরিমাণ নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়। কালোরিমেট্রিক অ্যাস এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস দুটি ধরণের জৈব রাসায়নিক অ্যাস। কালোরিমেট্রিক অ্যাস এমন একটি প্রতিক্রিয়া যা বিকারক এবং বিশ্লেষকগুলির মধ্যে একটি এনজাইমেটিক বা রাসায়নিক বিক্রিয়ার কারণে রঙ পরিবর্তনের দিকে পরিচালিত করে যখন ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাস একটি কৌশল যা এনজাইম বিক্রিয়ার গতি প্রক্রিয়া নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়। উভয় অ্যাসই একটি এনজাইমেটিক প্রতিক্রিয়ার উপর নির্ভর করে যা একটি সাবস্ট্রেট এবং একটি বিশ্লেষক জড়িত। ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসগুলি কালারমেট্রিক অ্যাসেগুলির চেয়ে বেশি সংবেদনশীল। সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণভাবে, ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসে দুটি তরঙ্গদৈর্ঘ্যের প্রয়োজন, যখন কালোরিমেট্রিক অ্যাসেগুলি শুধুমাত্র একটি তরঙ্গদৈর্ঘ্যের সাথে করা যেতে পারে।সুতরাং, এটি কালারমিট্রিক এবং ফ্লুরোমেট্রিক অ্যাসের মধ্যে পার্থক্যকে সংক্ষিপ্ত করে৷