BCA এবং ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল BCA অ্যাস সময়সাপেক্ষ এবং কম নির্ভুল, যেখানে ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস দ্রুত এবং নির্ভুল৷
BCA এবং ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস প্রোটিন ঘনত্ব নির্ধারণের দুটি পরীক্ষা পদ্ধতি। এই দুটি অ্যাসেই পরীক্ষার বিভিন্ন নীতি এবং তাদের নির্ভুলতার পার্থক্য রয়েছে৷
BCA অ্যাস কি?
BCA অ্যাস বা বিসিঙ্কোনিনিক অ্যাসিড অ্যাস হল একটি জৈব রাসায়নিক অ্যাস যা একটি দ্রবণে প্রোটিনের মোট ঘনত্ব নির্ধারণে কার্যকর। এই পদ্ধতির উদ্ভাবক পল কে স্মিথের নামানুসারে স্মিথ অ্যাসে নামেও নামকরণ করা হয়েছে। এই বিশ্লেষণাত্মক পদ্ধতিটি লোরি প্রোটিন অ্যাস, ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস বা বিউরেট রিএজেন্টের সাথে মিল দেখায়।আমরা একটি প্রদত্ত নমুনায় মোট প্রোটিনের ঘনত্ব পর্যবেক্ষণ করতে পারি নমুনা দ্রবণের রঙ পরিবর্তনের মাধ্যমে, যা সবুজ থেকে বেগুনি হয়ে যায়। এই রঙের পরিবর্তন প্রোটিন সামগ্রীর অনুপাতে ঘটে। তারপরে আমরা নমুনায় রঙের তীব্রতা এবং প্রোটিন সামগ্রী বিশ্লেষণ করার জন্য একটি বর্ণমিত্রিক কৌশল ব্যবহার করতে পারি।
BCA প্রোটিন অনুমানের পদ্ধতি
BCA অ্যাসের প্রক্রিয়া বিবেচনা করার সময়, সাধারণ BCA দ্রবণে প্রায় 11.25 এর pH সহ একটি উচ্চ ক্ষারীয় দ্রবণ থাকে এবং এই দ্রবণের উপাদানগুলির মধ্যে রয়েছে বিসিনকোনিনিক অ্যাসিড, সোডিয়াম কার্বনেট, সোডিয়াম বাইকার্বনেট, সোডিয়াম টার্টরেট এবং তামা (II) সালফেট পেন্টাহাইড্রেট। এই পরীক্ষাটি মূলত দুটি রাসায়নিক বিক্রিয়ার উপর নির্ভর করে: প্রোটিনের পেপটাইড বন্ড দ্বারা তামা (II) থেকে তামা (I) হ্রাস এবং তামা (I) আয়নের সাথে বিকিঙ্কোনিনিক অ্যাসিডের দুটি অণুর চিলেশন, ফলে একটি বেগুনি রঙের কমপ্লেক্স হতে পারে 562 এনএম তরঙ্গদৈর্ঘ্যে আলো শোষণ করে। প্রথম প্রতিক্রিয়ায়, পেপটাইড বন্ড দ্বারা হ্রাসকৃত তামার পরিমাণ (II) নমুনায় প্রোটিনের পরিমাণের সমানুপাতিক।
ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস কি?
ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস হল একটি বর্ণালী বিশ্লেষনমূলক পদ্ধতি যা একটি দ্রবণে প্রোটিনের ঘনত্ব পরিমাপ করতে কার্যকর। এই পদ্ধতিটি 1976 সালে মেরিয়ন এম ব্র্যাডফোর্ড দ্বারা তৈরি করা হয়েছিল, এবং এটি একটি তুলনামূলক দ্রুত এবং সঠিক পদ্ধতি৷
প্রোটিন এবং ব্র্যাডফোর্ড রিএজেন্টের রঙের প্রতিক্রিয়া
আমরা একটি নমুনায় প্রোটিনের পরিমাণের ঘনত্ব নির্ধারণ করতে এই পদ্ধতিটি ব্যবহার করতে পারি। এই পরীক্ষার সময় নমুনায় যে রাসায়নিক বিক্রিয়া ঘটে তা সম্পূর্ণরূপে নমুনার প্রোটিনের অ্যামিনো অ্যাসিড গঠনের উপর নির্ভর করে।
ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অনুমানের পদ্ধতি
এই অ্যাসের পদ্ধতিটি বিবেচনা করার সময়, এটি একটি বর্ণমিত্রিক প্রোটিন অ্যাস যা Coomassie Brilliant Blue G-250 নামক ছোপের শোষণ স্থানান্তরের উপর ভিত্তি করে। সাধারণত, এই রঞ্জকটি অ্যানিওনিক (নীল) ফর্ম, নিরপেক্ষ (সবুজ) ফর্ম এবং ক্যাটানিক (লাল) ফর্ম হিসাবে তিনটি আকারে বিদ্যমান। অতএব, অম্লীয় অবস্থার অধীনে, রঞ্জক তার রঙ লাল থেকে নীলে পরিবর্তিত হয়। এটি রঞ্জক পদার্থের সাথে প্রোটিনের আবদ্ধতার কারণে। বিপরীতে, যদি রঞ্জকের সাথে আবদ্ধ করার জন্য কোনও প্রোটিন না থাকে তবে রঙের পরিবর্তন দেখা যায় না, দ্রবণটি লাল-বাদামী রঙ পায়। এই রঞ্জক ভ্যান ডের ওয়াল ফোর্স এবং ইলেক্ট্রোস্ট্যাটিক আকর্ষণের মাধ্যমে প্রোটিনের কার্বক্সিল গ্রুপের সাথে একটি শক্তিশালী, ননকোভ্যালেন্ট কমপ্লেক্স গঠন করতে সক্ষম৷
BCA এবং ব্র্যাডফোর্ড অ্যাসের মধ্যে পার্থক্য কী?
BCA এবং ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস প্রোটিন ঘনত্ব নির্ধারণের দুটি পরীক্ষা পদ্ধতি। এই দুটি অ্যাসেসের আলাদা আলাদা নীতি রয়েছে এবং তাদের নির্ভুলতার মধ্যে পার্থক্য রয়েছে। বিসিএ এবং ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে বিসিএ অ্যাস সময়সাপেক্ষ এবং কম নির্ভুল, যেখানে ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস দ্রুত এবং নির্ভুল।
নিম্নলিখিত ইনফোগ্রাফিকটি সারণী আকারে বিসিএ এবং ব্র্যাডফোর্ড পরীক্ষার মধ্যে পার্থক্যগুলিকে সংক্ষিপ্ত করে৷
সারাংশ – BCA বনাম ব্র্যাডফোর্ড অ্যাসে
BCA অ্যাস বা বিসিঙ্কোনিনিক অ্যাসিড অ্যাস হল একটি জৈব রাসায়নিক অ্যাস যা একটি দ্রবণে প্রোটিনের মোট ঘনত্ব নির্ধারণে কার্যকর। ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস হল একটি বর্ণালী বিশ্লেষনমূলক পদ্ধতি যা একটি দ্রবণে প্রোটিনের ঘনত্ব পরিমাপ করতে কার্যকর। BCA এবং ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল BCA সময়সাপেক্ষ এবং কম নির্ভুল, যেখানে ব্র্যাডফোর্ড অ্যাস দ্রুত এবং নির্ভুল।
