ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাসয়ের মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস ডাই Coomassie ব্রিলিয়ান্ট ব্লু G-250 এর শোষণ পরিবর্তনের উপর ভিত্তি করে যেখানে লোরি প্রোটিন অ্যাস তামা আয়ন (Cu+) আয়নগুলির প্রতিক্রিয়ার উপর ভিত্তি করে Folin-Cioc alteu রিএজেন্টের সাথে পেপটাইড বন্ধনের অক্সিডেশন দ্বারা উত্পাদিত হয়।
একটি অ্যাস একটি বিশ্লেষণাত্মক কৌশল যা একটি নমুনার প্রধান কার্যকরী উপাদানগুলিকে চিহ্নিত করতে সহায়তা করে। অতএব, একটি পরীক্ষা গুণগত বা পরিমাণগত পরীক্ষা হতে পারে। ল্যাবরেটরি মেডিসিন, ফার্মাকোলজি, এনভায়রনমেন্টাল বায়োলজি, মলিকুলার বায়োলজি, বায়োকেমিস্ট্রি এবং ইমিউনোলজি সহ অনেক ক্ষেত্র নিয়মিতভাবে এই ধরনের অ্যাস ব্যবহার করে।ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাস দুটি জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা যা একটি নমুনা সমাধানে প্রোটিনের ঘনত্ব নির্ধারণ করে। উভয় অ্যাসেই ফলাফল প্রদানের জন্য কালারমিট্রিক কৌশল ব্যবহার করে।
ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস কি?
ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস প্রোটিন বিশ্লেষণের জন্য একটি দ্রুত স্পেকট্রোস্কোপিক বিশ্লেষণী পদ্ধতি। একটি দ্রবণে প্রোটিনের ঘনত্ব পরিমাপ করার সময় এটি উচ্চ নির্ভুলতা দেখায়। মেরিয়ন ব্র্যাডফোর্ড 1976 সালে এই পদ্ধতিটি চালু করেছিলেন। এই অ্যাসে, মোট প্রতিক্রিয়া পরিমাপ করা প্রোটিনের অ্যামিনো অ্যাসিড গঠনের উপর ভিত্তি করে। অন্য পদে, ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস হল একটি কালোরিমেট্রিক অ্যাস। এটি ডাই Coomassie উজ্জ্বল নীল ব্যবহার করে। সুতরাং, এই কালোরিমেট্রিক প্রোটিন অ্যাস রঞ্জকের শোষণের স্থানান্তরের উপর নির্ভর করে। Coomassie ব্রিলিয়ান্ট ব্লু G-250 তিনটি ফরম্যাটে বিদ্যমান: cationic (লাল), anionic (নীল) এবং নিরপেক্ষ (সবুজ)। অম্লীয় অবস্থার সময়, রঞ্জকের লাল রূপ নীলে রূপান্তরিত হয়। এটি প্রোটিনের বাঁধাই নিশ্চিত করে। প্রোটিন উপস্থিত না থাকলে, দ্রবণটি বাদামী রঙে থাকতে পারে।
চিত্র 01: ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন পরীক্ষা
ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস অন্যান্য প্রোটিন অ্যাসে থেকে আলাদা কারণ এটি প্রোটিন দ্রবণে উপস্থিত বিভিন্ন রাসায়নিক যৌগের হস্তক্ষেপের জন্য কম সংবেদনশীল। এই যৌগগুলির মধ্যে রয়েছে সোডিয়াম, পটাসিয়াম, গ্লুকোজ এবং সুক্রোজ ইত্যাদি।
লোরি প্রোটিন অ্যাস কি?
লোরি প্রোটিন অ্যাস হল একটি জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা যা একটি দ্রবণে প্রোটিনের মোট স্তর নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়। অলিভার এইচ. লোরি হলেন সেই ব্যক্তি যিনি 1940 সালে এই বিকারকটি তৈরি করেছিলেন। পদ্ধতিটি একটি রঙ পরিবর্তনের মাধ্যমে দ্রবণের মোট প্রোটিন ঘনত্বকে চিত্রিত করে যা দ্রবণে প্রোটিনের ঘনত্বের সমানুপাতিক। তাই, এটিও একটি কালোরিমেট্রিক প্রোটিন অ্যাস।
পেপটাইড বন্ড এবং ফোলিন-সিওকালটিউ রিএজেন্টের জারণ দ্বারা উত্পাদিত তামার আয়ন (Cu+) এর মধ্যে প্রতিক্রিয়া এই পদ্ধতির ভিত্তি।এছাড়াও, এই বিকারকটিতে ফসফোমোলিবিডিক অ্যাসিড এবং ফসফর-টুংস্টিক অ্যাসিড রয়েছে। যাইহোক, লোরি প্রোটিন অ্যাসের প্রতিক্রিয়া প্রক্রিয়াটি ভালভাবে বোঝা যায় না। কিন্তু এতে সিস্টাইন, ট্রিপটোফান এবং টাইরোসিনের অবশিষ্টাংশ ফোলিন-সিওকালটিউ রিএজেন্ট হ্রাসের মাধ্যমে জারণ জড়িত।
চিত্র 02: লোরি প্রোটিন অ্যাসে
সিস্টাইনের অবশিষ্টাংশ লোরি প্রোটিন অ্যাসে পরিলক্ষিত শোষণে অবদান রাখে এবং প্রতিক্রিয়ার ফলে একটি উজ্জ্বল নীল অণু তৈরি হয়; heteropoly molybdenum নীল। এই অণুর হ্রাস 660nm এ শোষণ দ্বারা পরিমাপ করা হয়। সুতরাং, সিস্টাইন এবং ট্রিপটোফান অবশিষ্টাংশের ঘনত্ব যা ফোলিন-সিওক্যাল্টু রিএজেন্টকে হ্রাস করে দ্রবণে প্রোটিনের মোট ঘনত্বকে হ্রাস করে।
ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাসের মধ্যে মিল কী?
- ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাস একটি সমাধানে প্রোটিনের ঘনত্ব নির্ধারণ করে।
- উভয় পদ্ধতিই রঙিন পদ্ধতি।
- এছাড়াও, উভয় পদ্ধতির সংবেদনশীলতা বেশি৷
ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাসের মধ্যে পার্থক্য কী?
ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাস হল দুটি ধরণের অ্যাস যা সমাধানে প্রোটিনের ঘনত্ব নির্ধারণ করে। ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস ডাই Coomassie ব্রিলিয়ান্ট ব্লু G-250-এর শোষণ পরিবর্তনের উপর নির্ভর করে যখন Lory প্রোটিন অ্যাস ফোলিন-সিওকালটিউ বিকারক সহ পেপটাইড বন্ধনের অক্সিডেশন দ্বারা উত্পাদিত কপার আয়নের প্রতিক্রিয়ার উপর নির্ভর করে। সুতরাং, এটি ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাসের মধ্যে মূল পার্থক্য। ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস একটি ফলাফল তৈরি করতে 15 মিনিট সময় নেয় যখন লোয়ারি প্রোটিন অ্যাস একটি ফলাফল তৈরি করতে 40-60 মিনিট সময় নেয়। সুতরাং, এটি ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাসের মধ্যে আরেকটি পার্থক্য। তদ্ব্যতীত, ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস অ্যামিনো অ্যাসিড রচনার উপর নির্ভরশীল যখন লোরি প্রোটিন অ্যাস অ্যামিনো অ্যাসিড রচনার উপর আংশিকভাবে নির্ভরশীল।সুতরাং, এটি ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাসের মধ্যেও একটি পার্থক্য৷
ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাসের মধ্যে পার্থক্য সম্পর্কে তথ্যের নীচে আরও বিশদ রয়েছে৷
সারাংশ – ব্র্যাডফোর্ড বনাম লোরি প্রোটিন অ্যাসে
একটি অ্যাসে একটি বিশ্লেষণাত্মক কৌশল যা একটি নমুনার প্রধান কার্যকরী উপাদানকে চিহ্নিত করতে ব্যবহৃত হয়। ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাস হল দুটি ধরণের প্রোটিন অ্যাস যা কালোরিমেট্রিক কৌশলগুলির অধীনে কাজ করে। ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাস উভয়ই একটি সমাধানে প্রোটিনের ঘনত্ব নির্ধারণ করে। যাইহোক, ব্র্যাডফোর্ড এবং লোরি প্রোটিন অ্যাসের মধ্যে মূল পার্থক্যটি তারা যে রঙিনমিট্রিক কৌশল ব্যবহার করে তার উপর নিহিত। ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাস Coomassie ব্রিলিয়ান্ট ব্লু G-250 ব্যবহার করে যখন Lory প্রোটিন অ্যাস কপার আয়ন (Cu+) আয়ন এবং Folin-Cioc alteu রিএজেন্ট ব্যবহার করে।অধিকন্তু, ব্র্যাডফোর্ড পদ্ধতি লোরি প্রোটিন অ্যাসয়ের চেয়ে দ্রুত ফলাফল দেয়। যাইহোক, উভয় পদ্ধতিই অত্যন্ত সংবেদনশীল পদ্ধতি এবং বিভিন্ন পদার্থের হস্তক্ষেপের বিষয়।
