অফিনিটি এবং আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে আমরা একটি মিশ্রণে চার্জযুক্ত বা আনচার্জড উপাদানগুলিকে আলাদা করতে অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করতে পারি যেখানে আমরা একটি মিশ্রণে চার্জযুক্ত উপাদানগুলিকে আলাদা করতে আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করতে পারি৷
ক্রোমাটোগ্রাফি এমন একটি কৌশল যা আমরা একটি মিশ্রণে পছন্দসই উপাদানগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহার করতে পারি। বিভিন্ন ধরনের যেমন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি, গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি ইত্যাদি। অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি এবং আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি হল তরল ক্রোমাটোগ্রাফির দুটি উপশ্রেণী। এছাড়াও, এই কৌশলগুলিতে, দুটি পর্যায় রয়েছে। যথা, তারা স্থির ফেজ এবং মোবাইল ফেজ।এই কৌশলগুলির উদ্দেশ্য হল উপাদানগুলিকে পৃথক করা, উপাদানগুলির বাঁধনের উপর নির্ভর করে, মোবাইল ফেজে স্থির পর্যায়ের পৃষ্ঠে।
অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি কি?
অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি জৈব রাসায়নিক কৌশল যা আমরা এই উপাদানগুলির মধ্যে মিথস্ক্রিয়াগুলির উপর নির্ভর করে একটি মিশ্রণে উপাদানগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহার করি৷
এই ক্ষেত্রে আমরা যে মিথস্ক্রিয়াগুলি ব্যবহার করি তা নিম্নলিখিতগুলি অন্তর্ভুক্ত করে:
- অ্যান্টিজেন-অ্যান্টিবডি মিথস্ক্রিয়া
- এনজাইম-সাবস্ট্রেট মিথস্ক্রিয়া
- রিসেপ্টর-লিগ্যান্ড মিথস্ক্রিয়া
- প্রোটিন-নিউক্লিক অ্যাসিড মিথস্ক্রিয়া
এই কৌশলটিতে, আমরা এই বিচ্ছেদ কৌশলটির জন্য অণুর আণবিক বৈশিষ্ট্য ব্যবহার করি। এখানে, আমরা হাইড্রোজেন বন্ধন, আয়নিক মিথস্ক্রিয়া, ডিসালফাইড ব্রিজ, হাইড্রোফোবিক মিথস্ক্রিয়া ইত্যাদির মাধ্যমে একটি স্থির পর্যায়ের সাথে যোগাযোগ করার অনুমতি দিই।যে অণুগুলি স্থির পর্যায়ের সাথে মিথস্ক্রিয়া করে না তারা প্রথমে নির্গত হবে। এইভাবে, আমরা এটি মিশ্রণ থেকে আলাদা করতে পারি। পছন্দসই যৌগটি স্থির পর্যায়ে সংযুক্ত থাকবে। অতএব, আমরা একটি ইলুটিং দ্রাবক ব্যবহার করে এটিকে বিচ্ছিন্ন করতে পারি এবং এটিকে আলাদা করার জন্য এটিকেও ইলুট করতে পারি।
চিত্র 01: একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম
অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি একটি বাফার দ্রবণ ব্যবহার করে একটি মিশ্রণ থেকে পদার্থকে পরিশোধন এবং ঘনীভূত করতে কার্যকর। এছাড়াও, এটি একটি মিশ্রণে অবাঞ্ছিত পদার্থ কমাতে সহায়ক। এই প্রক্রিয়াটির জন্য আমরা যে যন্ত্রপাতি ব্যবহার করি তা বিবেচনা করার সময়, আমাদের স্থির পর্যায়ে ভরা একটি কলাম ব্যবহার করা উচিত। তারপরে, আমাদের মোবাইল ফেজটি লোড করা উচিত যাতে জৈব অণুগুলি রয়েছে যা আমরা আলাদা করতে যাচ্ছি।এর পরে, তাদের স্থির ফেজ দিয়ে আবদ্ধ করার অনুমতি দিন। তারপরে, একটি ওয়াশ বাফার ব্যবহার করে, আমরা লক্ষ্যবহির্ভূত জৈব অণুগুলিকে আলাদা করতে পারি, তবে পৃথকীকরণ প্রক্রিয়া সফল করার জন্য লক্ষ্য অণুগুলির স্থির পর্যায়ের জন্য একটি উচ্চ সখ্যতা থাকা উচিত৷
আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি কি?
আয়ন ক্রোমাটোগ্রাফি হল তরল ক্রোমাটোগ্রাফির একটি রূপ যেখানে আমরা আয়নিক পদার্থ বিশ্লেষণ করতে পারি। প্রায়শই, আমরা এটি অজৈব অ্যানয়ন এবং ক্যাটেশন (যেমন ক্লোরাইড এবং নাইট্রেট অ্যানিয়ন এবং পটাসিয়াম, সোডিয়াম ক্যাটেশন) বিশ্লেষণ করতে ব্যবহার করি। যদিও এটি কম সাধারণ, আমরা জৈব আয়নগুলিও বিশ্লেষণ করতে পারি। তদুপরি, আমরা প্রোটিন পরিশোধনের জন্য এই কৌশলটি ব্যবহার করতে পারি কারণ প্রোটিনগুলি নির্দিষ্ট pH মানগুলিতে অণু চার্জ করা হয়। এখানে, আমরা একটি কঠিন স্থির পর্যায় ব্যবহার করি যার সাথে চার্জযুক্ত কণা সংযুক্ত করতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, আমরা রজন পলিস্টাইরিন-ডিভিনাইলবেনজিন কপলিমারগুলিকে শক্ত সমর্থন হিসাবে ব্যবহার করতে পারি৷
চিত্র 02: আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফির পর্যায়
এটি আরও ব্যাখ্যা করার জন্য, স্থির পর্যায়ে স্থির আয়ন রয়েছে যেমন সালফেট অ্যানয়ন বা কোয়াটারনারি অ্যামাইন ক্যাটেশন। যদি আমরা এই সিস্টেমের নিরপেক্ষতা বজায় রাখতে চাই তবে এর প্রতিটিকে একটি কাউন্টারিয়ন (বিপরীত চার্জ সহ একটি আয়ন) এর সাথে যুক্ত করা উচিত। এখানে, যদি কাউন্টারিয়ান একটি ক্যাটেশন হয়, তাহলে আমরা সিস্টেমটিকে ক্যাটান এক্সচেঞ্জ রজন হিসাবে নাম দিই। কিন্তু, যদি কাউন্টারিয়ন একটি অ্যানিয়ন হয়, তবে সিস্টেমটি একটি অ্যানিয়ন বিনিময় রজন৷
আয়ন বিনিময় প্রক্রিয়ায় পাঁচটি প্রধান পর্যায় রয়েছে;
- প্রাথমিক পর্যায়
- লক্ষ্যের শোষণ
- ইলুশনের শুরু
- বিলুপ্তির সমাপ্তি
- পুনরুত্থান
অ্যাফিনিটি এবং আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে পার্থক্য কী?
অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি জৈব রাসায়নিক কৌশল যা আমরা এই উপাদানগুলির মধ্যে মিথস্ক্রিয়াগুলির উপর নির্ভর করে একটি মিশ্রণে উপাদানগুলিকে পৃথক করতে ব্যবহার করি যেখানে আয়ন ক্রোমাটোগ্রাফি হল তরল ক্রোমাটোগ্রাফির একটি রূপ যেখানে আমরা আয়নিক পদার্থগুলি বিশ্লেষণ করতে পারি। অতএব, অ্যাফিনিটি এবং আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে প্রধান পার্থক্য হল যে আমরা আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করতে পারি শুধুমাত্র আয়নিক পদার্থের বিচ্ছেদের জন্য যখন অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি চার্জড এবং আনচার্জড উভয় কণাকে আলাদা করতে সক্ষম। কাজের নীতি বিবেচনা করার সময়, অ্যাফিনিটি এবং আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে পার্থক্য হল যে অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি এগিয়ে যায় এই কারণে যে লক্ষ্য অণুগুলির স্থির পর্যায়ের জন্য উচ্চ সখ্যতা রয়েছে। যাইহোক, আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য, লক্ষ্য অণুগুলির স্থির ফেজ পৃষ্ঠের বিপরীত চার্জ থাকে।
নীচের ইনফোগ্রাফিকটি পাশাপাশি তুলনা হিসাবে অ্যাফিনিটি এবং আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে পার্থক্য উপস্থাপন করে৷
সারাংশ – অ্যাফিনিটি বনাম আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি
সংক্ষেপে, অ্যাফিনিটি এবং আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি তরল ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশলগুলির দুটি রূপ। অ্যাফিনিটি এবং আয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে আমরা একটি মিশ্রণে চার্জযুক্ত বা আনচার্জড উপাদানগুলিকে আলাদা করতে অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করতে পারি যেখানে আমরা একটি মিশ্রণে চার্জযুক্ত উপাদানগুলিকে আলাদা করতে আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করতে পারি৷