জেল পরিস্রাবণ এবং অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে জেল পরিস্রাবণ ক্রোমাটোগ্রাফি আণবিক ওজন বা বিশ্লেষক নমুনার আকারের পার্থক্যের উপর নির্ভর করে, যেখানে অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি নির্ভর করে একটি অচল লিগ্যান্ডের সাথে একজন বিশ্লেষকের সখ্যতার উপর।
বিশ্লেষণাত্মক রসায়নে ক্রোমাটোগ্রাফি শব্দটি বিভিন্ন কৌশল ব্যবহার করে একটি মিশ্রণে উপাদানগুলির পৃথকীকরণের প্রক্রিয়াকে বোঝায়। ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি সমষ্টিগত নাম যা বিচ্ছেদের জন্য বিভিন্ন পদ্ধতির বিভিন্ন সংখ্যক প্রতিনিধিত্ব করে।
জেল ফিল্টারেশন ক্রোমাটোগ্রাফি কি?
জেল পরিস্রাবণ ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি বিশ্লেষণাত্মক কৌশল যেখানে উপাদানগুলির পৃথকীকরণ আণবিক ওজন বা আকারের পার্থক্যের উপর নির্ভর করে। এই কৌশলটি আকার-বর্জন ক্রোমাটোগ্রাফি বা আণবিক-চালনী ক্রোমাটোগ্রাফি নামেও পরিচিত। এই প্রক্রিয়ার বিভাজন কৌশল জেল-পরিস্রাবণ মাধ্যমের ছিদ্রে প্রবেশ করার জন্য নমুনার অণুগুলির ভিন্ন ক্ষমতার উপর নির্ভর করে৷
জেল পরিস্রাবণ কৌশলে, স্থির পর্যায়ে হাইড্রেটেড, স্পঞ্জের মতো উপাদানের পুঁতি থাকে যাতে আণবিক মাত্রার ছিদ্র থাকে যার আকারের একটি সংকীর্ণ পরিসর থাকে। যদি আমরা এই "আণবিক চালনি" ধারণকারী একটি কলামের মধ্য দিয়ে বিভিন্ন আকারের অণু সমন্বিত একটি জলীয় দ্রবণ পাস করি, তাহলে পরিস্রাবণ মাধ্যমের ছিদ্রের চেয়ে বড় অণুগুলি দ্রুত কলামের মধ্য দিয়ে চলে যায়। বিপরীতে, ছোট অণুগুলি জেলের ছিদ্রগুলিতে প্রবেশ করে এবং কলামের মধ্য দিয়ে ধীরে ধীরে সরে যায়। অণুগুলি আণবিক আকার হ্রাস করার ক্রমে কলাম থেকে নির্গত হয়।এখানে, জেলের বর্জনের সীমা হল প্রদত্ত জেলের ছিদ্র ভেদ করতে অক্ষম ক্ষুদ্রতম অণুগুলির আণবিক ভর৷
বিভিন্ন ধরনের জেল পরিস্রাবণ কৌশল রয়েছে, যেমন পরোক্ষ জেল পরিস্রাবণ পদ্ধতি, স্টেডি-স্টেট জেল পরিস্রাবণ, জেল পুঁতি ডায়ালাইসিস, ইত্যাদি। পরোক্ষ জেল পরিস্রাবণ ক্রোমাটোগ্রাফি বিনামূল্যে থাইরয়েড হরমোন নির্ধারণে কার্যকর। স্টেডি-স্টেট জেল পরিস্রাবণ ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি পরোক্ষ কৌশল যা বেশিরভাগই বিনামূল্যে স্টেরয়েড যেমন কর্টিসল, টেস্টোস্টেরন ইত্যাদি পরিমাপের জন্য উপযোগী। অন্যদিকে জেল বিড ডায়ালাইসিস হল স্টেডি-স্টেট জেল ফিল্টারেশনের একটি পরিবর্তন যা তুলনামূলকভাবে সহজ।
অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি কি?
অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি একটি বিশ্লেষণাত্মক কৌশল এবং একটি পৃথকীকরণ পদ্ধতি যা একটি অচল লিগ্যান্ড এবং এর বাঁধাই অংশীদারের মধ্যে একটি নির্দিষ্ট বাঁধাই মিথস্ক্রিয়া উপর নির্ভর করে।কিছু উদাহরণের মধ্যে রয়েছে অ্যান্টিবডি-অ্যান্টিজেন বাইন্ডিং, এনজাইম-সাবস্ট্রেট বাইন্ডিং এবং এনজাইম-ইনহিবিটর বাইন্ডিং। তাই, নিউক্লিক অ্যাসিড পরিশোধন, কোষের নির্যাস থেকে প্রোটিন পরিশোধন এবং রক্ত থেকে পরিশোধনে এই কৌশলটির অনেক গুরুত্বপূর্ণ প্রয়োগ রয়েছে।
এই কৌশলে, সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্য হল লিগ্যান্ড অচলাবস্থা। আমরা এর জন্য অ্যাক্রিলেট এবং সিলিকা জেলের মতো বিভিন্ন উপকরণ ব্যবহার করতে পারি। লিগ্যান্ডে লক্ষ্য অণুর স্টেরিক হস্তক্ষেপ প্রতিরোধ করা গুরুত্বপূর্ণ। তদুপরি, কঠিন পর্যায়ের সাথে একটি ইনহিবিটার সংযুক্ত থাকে। এই ইনহিবিটারকে আমরা স্পেসার বলি। শাস্ত্রীয়ভাবে, একটি স্পেসার একটি হাইড্রোকার্বন চেইন নিয়ে গঠিত।
অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফির স্থির ধাপে কোর, স্পেসার এবং লিগ্যান্ড থাকে।কখনও কখনও, এটিতে একটি ধাতব আয়নও থাকে যা লিগ্যান্ডের সাথে মিলিত হয়। এই কৌশলে স্থির পর্যায়ের জন্য সবচেয়ে পছন্দের কঠিন পর্যায় হল অ্যাগারোজ জেল কারণ এটি যেকোন আকারের রজন বেড দিয়ে কলামটি পূরণ এবং প্যাক করার জন্য সহজে বিতরণ করা হয় এবং এটি জৈব অণুগুলি পুঁতির মধ্যে এবং মাধ্যমে অবাধে প্রবাহিত হওয়ার জন্য যথেষ্ট বড়। লিগ্যান্ডগুলি বিভিন্ন উপায়ে গুটিকা পলিমারের সাথে সমন্বিতভাবে সংযুক্ত করতে পারে। সর্বাধিক সাধারণ স্পেসার যৌগগুলি হল সায়ানোজেন ব্রোমাইড, ইপোক্সাইড, সি 6 অ্যাসিড সহ ইপোক্সাইড এবং ডায়ামিন। অন্যদিকে, আমরা যে লিগ্যান্ড ব্যবহার করতে পারি তা লক্ষ্য অনুযায়ী ভিন্ন হয়, যেমন, অ্যান্টিবডি-অ্যান্টিজেন, আয়রন বা অ্যালুমিনিয়াম আয়ন-ফসফোপ্রোটিন, অ্যাভিডিন-বায়োটিন, গ্লুটাথিয়ন-জিএসটি, চেলেটর-হিস-ট্যাগযুক্ত প্রোটিন ইত্যাদি।
জেল ফিল্টারেশন এবং অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে পার্থক্য কী?
ক্রোমাটোগ্রাফি একটি গুরুত্বপূর্ণ বিশ্লেষণী কৌশল। জেল পরিস্রাবণ ক্রোমাটোগ্রাফি এবং অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি ক্রোমাটোগ্রাফির দুটি গুরুত্বপূর্ণ বৈচিত্র। জেল পরিস্রাবণ এবং অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে জেল পরিস্রাবণ ক্রোমাটোগ্রাফি আণবিক ওজন বা বিশ্লেষক নমুনার আকারের পার্থক্যের উপর নির্ভর করে, যেখানে অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি একটি অচল লিগ্যান্ডের সাথে একজন বিশ্লেষকের সখ্যতার উপর নির্ভর করে।
সারাংশ – জেল পরিস্রাবণ বনাম অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি
তাদের প্রয়োগ এবং বিশ্লেষক নমুনার প্রকৃতি অনুসারে বিভিন্ন ধরণের ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল রয়েছে। জেল পরিস্রাবণ এবং অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি এই ধরনের দুটি কৌশল। জেল পরিস্রাবণ এবং অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে জেল পরিস্রাবণ ক্রোমাটোগ্রাফি আণবিক ওজন বা বিশ্লেষক নমুনার আকারের পার্থক্যের উপর নির্ভর করে, যেখানে অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি নির্ভর করে একটি অচল লিগ্যান্ডের সাথে একজন বিশ্লেষকের সখ্যতার উপর৷
