কী পার্থক্য – কাগজ বনাম পাতলা স্তর বনাম কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি
পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি, থিন লেয়ার ক্রোমাটোগ্রাফি এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি তিন ধরনের ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল। কাগজের ক্রোমাটোগ্রাফি, পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে মূল পার্থক্য ক্রোমাটোগ্রাফি কৌশলে ব্যবহৃত স্থির পর্যায়ের ধরণের উপর ভিত্তি করে। পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি একটি সেলুলোজ কাগজ ব্যবহার করে তার স্থির ফেজ হিসাবে, পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি তার স্থির ফেজ হিসাবে অ্যালুমিনা বা সিলিকা জেল ব্যবহার করে, যেখানে কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি তার স্থির ফেজ হিসাবে একটি উপযুক্ত ম্যাট্রিক্স উপাদান সহ একটি কলাম ব্যবহার করে।
প্রোটিন এবং কার্বোহাইড্রেটের মতো জৈব অণুগুলির পৃথকীকরণ এবং সনাক্তকরণের প্রক্রিয়ায়, ক্রোমাটোগ্রাফি একটি গুরুত্বপূর্ণ জৈব-পদার্থিক কৌশল ব্যবহৃত হয়। ক্রোমাটোগ্রাফি যৌগগুলিকে তাদের দ্রবণীয়তা, আকার এবং চার্জের উপর ভিত্তি করে পৃথক করে। বিভাজন প্রক্রিয়ার উপর ভিত্তি করে, ক্রোমাটোগ্রাফি আয়ন বিনিময়, শোষণ, পার্টিশন এবং আকার বর্জনের মতো প্রক্রিয়া ব্যবহার করে এবং তিনটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল রয়েছে; যথা, কাগজ, পাতলা স্তর, এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি। পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি যৌগের কঠিন-তরল শোষণ এবং দ্রবণীয়তার উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয় এবং এটি একটি সেলুলোজ কাগজকে স্থির পর্যায় হিসাবে ব্যবহার করে। পাতলা স্তরের ক্রোমাটোগ্রাফি অণুর কঠিন-তরল শোষণের উপর ভিত্তি করে। এটির একটি স্থির ফেজ রয়েছে যা সাধারণত অ্যালুমিনা বা সিলিকা জেল দিয়ে তৈরি হয় এবং মোবাইল ফেজটি দ্রাবক। কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি একটি ম্যাট্রিক্স সহ একটি কলাম ব্যবহার করে যা মূলত তাদের আকার, সম্বন্ধ বা তার চার্জের উপর ভিত্তি করে অণুগুলিকে পৃথক করতে ব্যবহৃত হয়।
পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি কি?
পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি হল সবচেয়ে সহজ ধরনের ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করা হয় এবং এটি ব্যাপক গবেষণার জন্য ব্যবহার করা হয় না। এটি মূলত ছাত্রদের পরীক্ষাগারে ব্যবহৃত হয় জৈব অণু যেমন অ্যামিনো অ্যাসিড এবং কার্বোহাইড্রেটের মিশ্রণে উপস্থিত শনাক্ত করতে। পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি একটি স্থির ফেজ ব্যবহার করে যা সেলুলোজ পেপার বা হোয়াটম্যান ফিল্টার পেপার ব্যবহার করে তৈরি করা হয় এবং একটি মোবাইল ফেজ যা সাধারণত জৈব দ্রাবক যেমন এন-বুটানল ইত্যাদি ব্যবহার করে তৈরি করা হয়। স্থির ফেজটি পানিতে পরিপূর্ণ হয়, যা স্থির ফেজটিকে তরল করে। এইভাবে, যৌগগুলির দ্রবণীয়তার উপর নির্ভর করে যখন যৌগগুলিকে চিহ্নিত করা হয় এবং মোবাইল ফেজের উপস্থিতিতে চালানোর অনুমতি দেওয়া হয়, তখন সেগুলি পৃথক করা হয়। এইভাবে, ক্রোমাটোগ্রামের বিকাশের উপর, প্রতিটি যৌগের রানের দৈর্ঘ্য নির্ধারণের জন্য স্টেনিং করা যেতে পারে। ধরে রাখার ফ্যাক্টর গণনা করা যেতে পারে।
চিত্র 01: পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি
পেপার ক্রোমাটোগ্রাফিকে আরও শ্রেণীবদ্ধ করা যেতে পারে আরোহী পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি এবং ডিসন্ডিং পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি চলমান দ্রাবকের দিকের উপর নির্ভর করে।
পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি কি?
পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি বা টিএলসি একটি মিশ্রণে উপস্থিত বিভিন্ন অ্যামিনো অ্যাসিড সনাক্ত করতে বা প্রোটিন সনাক্তকরণের জন্য একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত কৌশল। পৃথকীকরণের কৌশলটি কঠিন-তরল শোষণের উপর ভিত্তি করে। পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফির সময়, অ্যালুমিনা বা সিলিকা জেল দিয়ে তৈরি একটি প্লেট স্থির পর্যায় হিসাবে ব্যবহৃত হয়। দ্রাবক মিশ্রণ প্রয়োজন অনুসারে পরিবর্তিত হয় এবং দ্রাবক প্রস্তুত করতে এন-বুটানল, অ্যাসিটিক অ্যাসিড এবং জলের মতো জৈব যৌগের বিভিন্ন সংমিশ্রণ ব্যবহার করতে পারে। আলাদা করা যৌগগুলি প্লেটে দেখা যায় এবং দ্রাবক মিশ্রণে নিমজ্জিত হয়। প্লেট দ্বারা প্রদত্ত কৈশিক ক্রিয়ার উপর ভিত্তি করে দ্রাবক একবার উপরে চলে গেলে, প্লেটে দাগযুক্ত যৌগগুলিও দ্রাবকের দ্রবণীয়তার উপর নির্ভর করে চলে যায়।
চিত্র 02: পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি
ক্রোমাটোগ্রামের পরে দাগ সনাক্তকরণ বিভিন্ন স্টেনিং পদ্ধতি দ্বারা পরিচালিত হয়। কেউ কেউ নিনহাইড্রিন স্টেনিং ব্যবহার করেন যা দাগ দেওয়ার মোটামুটি একটি বিষাক্ত পদ্ধতি। আধুনিক পাতলা স্তরের ক্রোমাটোগ্রামগুলি দৌড়ের পরে ক্রোমাটোগ্রাম দেখতে ফ্লুরোসেন্স কৌশল ব্যবহার করে। এটি ভ্রমণ করা দূরত্বের উপর নির্ভর করে, প্রতিটি যৌগের ধারণ সময় গণনা করা যেতে পারে। এটি ব্যবহৃত মিশ্রণের উপর ভিত্তি করে আলাদা করা যৌগের ধরন সনাক্ত করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। টিএলসি প্রধানত প্রোটিন মিশ্রণে অ্যামিনো অ্যাসিড সনাক্ত করতে এবং মিশ্রণে উপস্থিত বিভিন্ন ধরণের মনোস্যাকারাইড আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়।
কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি কি?
কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি একটি বিস্তৃত শব্দ যা অনেক ধরনের ক্রোমাটোগ্রাফি কৌশল বর্ণনা করতে ব্যবহৃত হয় যা কলাম ভিত্তিক পৃথকীকরণ পদ্ধতি ব্যবহার করে।কলাম ক্রোমাটোগ্রাফিতে, যৌগগুলিকে আলাদা করতে একটি প্যাকিং উপাদান সহ একটি ভৌত কলাম ব্যবহার করা হয়। পৃথকীকরণ যৌগ দ্বারা প্রদর্শিত বিভিন্ন শারীরিক বৈশিষ্ট্যের উপর ভিত্তি করে হতে পারে। এই বৈশিষ্ট্যগুলি চার্জ, আকার, 3D কনফর্মেশন এবং বাঁধাই ক্ষমতা ইত্যাদি হতে পারে৷ এইভাবে, ম্যাট্রিক্স উপাদান দিয়ে প্যাক করা কলামটি স্থির ফেজ হিসাবে কাজ করে এবং কলামে প্রয়োগ করা ওয়াশ বাফার মোবাইল ফেজ হিসাবে কাজ করে৷
আকারের উপর ভিত্তি করে অণুগুলোকে আলাদা করা হলে, প্যাকিং উপাদানটি এমনভাবে প্যাক করা হয় যাতে যৌগগুলোর মধ্য দিয়ে যাওয়ার জন্য এটি ছিদ্র ছেড়ে দেয়। এইভাবে, ছিদ্রের মধ্য দিয়ে প্রবাহিত হতে পারে না এমন বড় অণুগুলি প্রথমে নির্গত হয়, যেখানে ছোট অণুগুলি নির্গত হতে অনেক বেশি সময় নেয়।
চিত্র 03: কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি
যদি অণুগুলিকে তাদের চার্জের উপর ভিত্তি করে পৃথক করা হয়, তবে স্থির পর্যায়ে একটি অ্যানিয়ন বা ক্যাটেশন এক্সচেঞ্জার থাকবে যার প্রতি যৌগগুলি তাদের চার্জের ভিত্তিতে আকৃষ্ট হবে। এইভাবে ওয়াশিং ধাপের সময়, অ-বাউন্ড যৌগগুলি বিলুপ্ত হবে। ইলুশন বাফার যোগ করার পরে, আবদ্ধ চার্জযুক্ত যৌগগুলি বিলুপ্ত হবে। এই উপাদানগুলির সনাক্তকরণ বেশিরভাগই স্পেকট্রোফটোমেট্রিক কৌশলগুলির উপর ভিত্তি করে৷
কাগজের পাতলা স্তর এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে মিল কী?
- অল পেপার থিন লেয়ার এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি তিনটি কৌশল অ্যামিনো অ্যাসিড, প্রোটিন এবং কার্বোহাইড্রেটের মতো জৈব অণুকে আলাদা করার জন্য ব্যবহার করা হয়।
- কাগজের পাতলা স্তর এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি কৌশলগুলির একটি মোবাইল ফেজ এবং একটি স্থির পর্যায় রয়েছে৷
- পেপার থিন লেয়ার এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি কৌশল বিভাজনের জন্য বায়োফিজিক্যাল মেকানিজম ব্যবহার করে।
কাগজের পাতলা স্তর এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে পার্থক্য কী?
কাগজ বনাম পাতলা স্তর বনাম কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি |
|
| পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি | পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল যা যৌগের তরল-তরল শোষণ এবং দ্রবণীয়তার উপর ভিত্তি করে যৌগগুলিকে পৃথক করতে ব্যবহার করে। এটি একটি সেলুলোজ কাগজ তার স্থির পর্যায় হিসাবে ব্যবহার করে৷ |
| পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি | পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি হল আরেকটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল যা অণুর কঠিন-তরল শোষণের উপর ভিত্তি করে। এটিতে অ্যালুমিনা বা সিলিকা জেল দিয়ে তৈরি একটি স্থির ফেজ এবং মোবাইল ফেজ হিসাবে একটি দ্রাবক রয়েছে, যা দ্রাবক। |
| কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি | কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি একটি ম্যাট্রিক্স সহ একটি কলাম ব্যবহার করে যা মূলত তাদের আকার, সম্বন্ধ বা তার চার্জের উপর ভিত্তি করে অণুগুলিকে পৃথক করতে ব্যবহৃত হয়। |
| স্থির পর্যায় | |
| পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি | হোয়াটম্যানের নাইট্রোসেলুলোজ দিয়ে তৈরি কাগজ কাগজের ক্রোমাটোগ্রাফিতে স্থির পর্যায় হিসাবে ব্যবহৃত হয়। |
| পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি | অ্যালুমিনা বা সিলিকা জেল পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফির স্থির পর্যায় হিসাবে ব্যবহৃত হয়। |
| কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি | কলাম ক্রোমাটোগ্রাফিতে স্থির পর্যায় হিসাবে উপযুক্ত প্যাকিং উপাদানে প্যাক করা একটি কলাম ব্যবহৃত হয়। |
| মোবাইল ফেজ | |
| পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি | রানিং দ্রাবক কাগজের ক্রোমাটোগ্রাফির মোবাইল ফেজ। |
| পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি | রানিং দ্রাবক হল পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফির মোবাইল ফেজ। |
| কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি | ওয়াশ বাফার হল কলাম ক্রোমাটোগ্রাফির মোবাইল ফেজ। |
| বিচ্ছেদের জন্য ব্যবহৃত প্রক্রিয়া | |
| পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি | পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি কঠিন-তরল শোষণের উপর ভিত্তি করে। |
| পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি | পাতলা স্তরের ক্রোমাটোগ্রাফি কঠিন-তরল শোষণের উপর ভিত্তি করে। |
| কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি | কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি আকার বর্জন, চার্জ এবং আকৃতির উপর ভিত্তি করে। |
| ইলুশন বাফার | |
| পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি | পেপার ক্রোমাটোগ্রাফির প্রয়োজন নেই। |
| পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি | পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য প্রয়োজন নেই। |
| কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি | কলাম ক্রোমাটোগ্রাফিতে প্রয়োজন। |
| শনাক্তকরণ | |
| পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি | দাগ দেওয়া এবং ধরে রাখার ফ্যাক্টর নির্ধারণ করে। |
| পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি | দাগ দেওয়া এবং ধরে রাখার ফ্যাক্টর নির্ধারণ করে। |
| কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি | স্পেকট্রোফটোমেট্রিক নির্ধারণ। |
সারাংশ – কাগজের পাতলা স্তর বনাম কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি
পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি, টিএলসি এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি হল বিভাজন কৌশল যা জৈব অণু যেমন প্রোটিন, অ্যামিনো অ্যাসিড এবং কার্বোহাইড্রেট (প্রধানত মনোস্যাকারাইড) আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়।পেপার ক্রোমাটোগ্রাফি একটি সেলুলোজ কাগজকে স্থির পর্যায় হিসাবে ব্যবহার করে এবং বিভাজনের প্রক্রিয়াটি কঠিন-তরল শোষণের উপর ভিত্তি করে। TLC কঠিন-তরল শোষণ প্রক্রিয়াও ব্যবহার করে। মোবাইল পর্বে তাদের দ্রবণীয়তার উপর নির্ভর করে অণুগুলি স্থির পর্যায়ে পৃথক করা হয়। কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি ভৌত বৈশিষ্ট্য যেমন আকার, আকৃতি, চার্জ এবং যৌগের আণবিক ওজন আলাদা করার জন্য ব্যবহার করে। ম্যাট্রিক্স উপাদান দিয়ে বস্তাবন্দী কলামটি স্থির পর্যায় হিসাবে কাজ করে, যেখানে ধোয়ার বাফার দ্রাবক ফেজ হিসাবে কাজ করে। এটি একটি কাগজের পাতলা স্তর এবং কলাম ক্রোমাটোগ্রাফির মধ্যে পার্থক্য৷
