FPLC এবং HPLC মূল পার্থক্য হল যে FPLC হল এক ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যা প্রোটিন, নিউক্লিওটাইড এবং পেপটাইডের মতো বড় জৈব অণুগুলিকে বিশুদ্ধ করে, অন্যদিকে HPLC হল এক ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যা ছোট আণবিক ওজনের যৌগগুলিকে আলাদা করে।
তরল ক্রোমাটোগ্রাফি এমন একটি কৌশল যা একটি নমুনাকে তার পৃথক উপাদানগুলিতে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়। মোবাইল এবং স্থির পর্যায়গুলির সাথে নির্দিষ্ট নমুনার মিথস্ক্রিয়ার কারণে এই বিচ্ছেদ ঘটে। একটি নমুনার মধ্যে উপাদানগুলি তরল ক্রোমাটোগ্রাফিতে মোবাইল ফেজের জন্য প্রতিটি উপাদানের সখ্যতার উপর ভিত্তি করে আলাদা করা হয়। মোবাইল ফেজ এবং নমুনা একটি কলামের মধ্য দিয়ে যাওয়ার সাথে সাথে নমুনার উপাদানগুলি ব্যান্ডে আলাদা হতে শুরু করে যা UV-VIS স্পেকট্রোস্কোপি দ্বারা সনাক্ত করা যেতে পারে।অতএব, FPLC এবং HPLC হল দুই ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি কৌশল।
FPLC কি?
FPLC হল এক ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যা প্রোটিন, নিউক্লিওটাইড এবং পেপটাইডের মতো বড় জৈব অণুকে বিশুদ্ধ করে। ফাস্ট প্রোটিন লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (এফপিএলসি) প্রথম 1982 সালে ফার্মাসিয়া কোম্পানি দ্বারা সুইডেনে তৈরি এবং বাজারজাত করা হয়েছিল। এটি প্রায়শই প্রোটিন মিশ্রণ বিশ্লেষণ বা বিশুদ্ধ করতে ব্যবহৃত হয়। এটি চলমান তরল (মোবাইল ফেজ) এবং একটি ছিদ্রযুক্ত কঠিন উপাদান (স্থির পর্যায়) এর জন্য নমুনা উপাদানগুলির সম্পর্কগুলির নীতির উপর ভিত্তি করে সঞ্চালিত হয়। FPLC-তে, মোবাইল ফেজ হল একটি বাফার, এবং স্থির ফেজ হল পুঁতির সমন্বয়ে গঠিত একটি রজন। এটি সাধারণত একটি নলাকার কাচ বা প্লাস্টিকের কলামে প্যাক করা ক্রস-লিঙ্কড অ্যাগারোজ দিয়ে থাকে।
চিত্র 01: FLPC (ফাস্ট প্রোটিন লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি) যন্ত্রপাতি
বেশিরভাগ FLPC কৌশলে, আয়ন বিনিময় রজন ব্যবহার করা হয়। অতএব, আগ্রহের প্রোটিন চার্জ মিথস্ক্রিয়া দ্বারা রজনে আবদ্ধ হবে। FLPC কৌশল দুটি বাফার ব্যবহার করে: বাফার 1 (চলমান বাফার) এবং বাফার 2 (ইলুশন বাফার)। প্রাথমিকভাবে, যখন বাফার এবং নমুনা মিশ্রণটি কলামের মধ্য দিয়ে চলে, তখন মিশ্রণে আগ্রহের প্রোটিন চার্জ মিথস্ক্রিয়া দ্বারা রজনে আবদ্ধ হবে। কিন্তু আগ্রহের প্রোটিন বিচ্ছিন্ন হয়ে যায় এবং ইলিউশন বাফারের সমাধানে ফিরে আসে যখন ইলুশন বাফার প্রক্রিয়ার শেষে কলামের মধ্য দিয়ে চলে। পরবর্তীতে, দ্রবণ (ইলুয়েন্ট যেটিতে আগ্রহের প্রোটিন থাকে) দুটি ডিটেক্টরের মধ্য দিয়ে যায়, যা লবণের ঘনত্ব এবং প্রোটিনের ঘনত্ব পরিমাপ করে। যেহেতু প্রতিটি প্রোটিন নির্গত হয়, এটি সনাক্তকরণের সময় একটি "শিখর" হিসাবে প্রদর্শিত হয় এবং পরবর্তী ব্যবহারের জন্য সংগ্রহ করা যেতে পারে৷
HPLC কি?
HPLC হল এক ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যা ছোট আণবিক ওজনের যৌগকে আলাদা করে। 1969 সালে, প্রথম HPLC বাণিজ্যিকভাবে ওয়াটার কর্পোরেশন, USA দ্বারা নির্মিত হয়েছিল।হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) এ, একটি দ্রাবক (মোবাইল ফেজ) একটি নমুনা মিশ্রণ (বিশ্লেষন) উচ্চ চাপে ক্রোমাটোগ্রাফিক প্যাকিং উপাদান (স্থির পর্যায়) সহ একটি কলামের মাধ্যমে পাম্প করা হয়। নমুনা মিশ্রণটি হিলিয়াম বা নাইট্রোজেনের চলমান বাহক গ্যাস প্রবাহ দ্বারা বহন করা হয়।
চিত্র 02: HPLC (হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি)
নমুনা মিশ্রণের যে উপাদানগুলি স্থির পর্যায়ের সাথে সর্বনিম্ন মিথস্ক্রিয়া বা মোবাইল ফেজের সাথে সর্বাধিক পরিমাণ মিথস্ক্রিয়া কলাম থেকে দ্রুত প্রস্থান করবে। অন্যদিকে, নমুনা মিশ্রণের উপাদানগুলি যেগুলির স্থির পর্যায়ের সাথে সর্বাধিক পরিমাণে মিথস্ক্রিয়া বা মোবাইল ফেজের সাথে সর্বনিম্ন মিথস্ক্রিয়া কলামটি ধীরে ধীরে প্রস্থান করবে। উপরের মিথস্ক্রিয়া নীতির উপর ভিত্তি করে, নমুনা মিশ্রণের উপাদানগুলিকে আলাদা করা যেতে পারে।অধিকন্তু, যন্ত্র আবিষ্কারক নমুনা মিশ্রণের প্রতিটি উপাদান সনাক্ত করে যা কলাম থেকে প্রস্থান করে। HPLC পরিচিত যৌগের উপস্থিতি বা অনুপস্থিতির জন্য পরিবেশগত এবং জৈবিক নমুনা পরীক্ষা করতে ব্যবহৃত হয়, যেমন ওষুধ, বিষ বা কীটনাশক। এটি ফার্মাসিউটিক্যাল, পরিবেশগত, ফরেনসিক এবং রাসায়নিকের মতো বিভিন্ন শিল্পে ব্যবহৃত হয়৷
FPLC এবং HPLC-এর মধ্যে মিল কী?
- FPLC এবং HPLC হল তরল ক্রোমাটোগ্রাফির প্রকার।
- উভয়ই জৈবিক নমুনা আলাদা করতে এবং সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়।
- এগুলির একটি তরল মোবাইল ফেজ এবং একটি কঠিন স্থির ফেজ রয়েছে৷
- উভয় কৌশলই নমুনার মধ্য দিয়ে যাওয়ার জন্য একটি কলাম ব্যবহার করে।
- এই কৌশলগুলি নমুনা পৃথকীকরণ এবং সনাক্তকরণের জন্য পাম্প, ডিটেক্টর, ভালভ এবং সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে৷
FPLC এবং HPLC-এর মধ্যে পার্থক্য কী?
FPLC হল এক ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যা প্রোটিন, নিউক্লিওটাইড এবং পেপটাইডের মতো বড় জৈব অণুগুলিকে বিশুদ্ধ করতে ব্যবহৃত হয়।HPLC হল এক ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যা ছোট আণবিক ওজনের যৌগগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়। সুতরাং, এটি FPLC এবং HPLC এর মধ্যে মূল পার্থক্য। অধিকন্তু, FPLC ভগ্নাংশ সংগ্রাহক হিসাবে pH এবং পরিবাহিতা মনিটর ব্যবহার করে। বিপরীতে, HPLC pH এবং পরিবাহিতা মনিটর এবং ভগ্নাংশ সংগ্রাহক ব্যবহার করে না।
নীচের ইনফোগ্রাফিক ছক আকারে FPLC এবং HPLC এর মধ্যে আরও পার্থক্য তালিকাভুক্ত করে৷
সারাংশ – FPLC বনাম HPLC
ক্রোমাটোগ্রাফি একটি পরীক্ষাগার বিশ্লেষণাত্মক কৌশল যা একটি মিশ্রণ থেকে উপাদান পৃথক করার জন্য ব্যবহৃত হয়। এটি কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি, গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি, লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি, আয়ন-এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি, ইত্যাদির মতো বিভিন্ন প্রকারে বিভক্ত। FPLC এবং HPLC হল দুই ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি কৌশল। এফপিএলসি হল এক ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যা প্রোটিন, নিউক্লিওটাইড এবং পেপটাইডের মতো বড় জৈব অণুগুলিকে বিশুদ্ধ করতে ব্যবহৃত হয়। অন্যদিকে, এইচপিএলসি হল এক ধরনের তরল ক্রোমাটোগ্রাফি যা ছোট আণবিক ওজনের যৌগগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়।সুতরাং, এটি এফপিএলসি এবং এইচপিএলসি-এর মধ্যে পার্থক্যের সারাংশ।
