HPLC এবং দ্রুত HPLC-এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল HPLC-এর জন্য আমরা যে পাম্পের চাপ ব্যবহার করি তা হল প্রায় 40 MPa যেখানে দ্রুত HPLC-এর জন্য পাম্পের চাপ প্রায় 3-5 MPa৷
একটি মিশ্রণের উপাদানগুলিকে আলাদা করার জন্য আমরা যে সবচেয়ে সাধারণ কৌশলটি ব্যবহার করি তা হল "তরল ক্রোমাটোগ্রাফি"। এই উদ্দেশ্য অর্জনের জন্য বেশ কিছু কৌশল রয়েছে যার মধ্যে HPLC খুবই জনপ্রিয়। HPLC হল হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি যা দ্রুত এবং কার্যকরী পদ্ধতিতে একটি তরল মিশ্রণের উপাদানগুলিকে চিহ্নিত করে, পরিমাণ নির্ধারণ করে এবং আলাদা করে। ফাস্ট এইচপিএলসি হল এইচপিএলসি-এর একটি বিশেষ অ্যাপ্লিকেশন যা দেরীতে সমাধান অধ্যয়নের সাথে জড়িতদের দৃষ্টি আকর্ষণ করেছে।
HPLC কি?
HPLC হল হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি। এটি দ্রাবকগুলিকে ধাক্কা দেওয়ার জন্য একটি উচ্চ চাপ ব্যবহার করে যাতে তারা একটি কলামের মধ্য দিয়ে যায়। এছাড়াও, অ্যামিনো অ্যাসিড, নিউক্লিক অ্যাসিড, কার্বোহাইড্রেট, স্টেরয়েড, অ্যান্টিবায়োটিক এবং হাইড্রোকার্বনের মতো বিভিন্ন যৌগকে আলাদা এবং অধ্যয়ন করার এটি একটি আদর্শ উপায়। উচ্চতর রেজোলিউশন এবং দ্রুত বিশ্লেষণের মতো মিশ্রণগুলি আলাদা করার অন্যান্য পদ্ধতির তুলনায় HPLC-এর অনেক সুবিধা রয়েছে। এটি পুনঃপ্যাকিং এবং পুনর্জন্মের প্রয়োজনীয়তা দূর করে এবং পরামিতিগুলির উপর আরও ভাল নিয়ন্ত্রণ সরবরাহ করে এবং এইভাবে বিচ্ছেদের দক্ষতা বৃদ্ধি করে। আদর্শভাবে, এইচপিএলসি বড় আকারের অ্যাপ্লিকেশনের জন্য উপযুক্ত কারণ এটি খুব ছোট কণাকে আলাদা করতে পারে এবং উচ্চ চাপ ব্যবহার করার অনুমতি দেয় যা দ্রাবককে সহজে প্রবাহিত করতে সহজ করে।
চিত্র 01: HPLC কলাম
সংক্ষেপে, এইচপিএলসি কৌশলটির পরিচালনার পদ্ধতিটি নিম্নরূপ। প্রথমত, আমাদের একটি পাম্প ব্যবহার করে বিচ্ছিন্ন অল্প পরিমাণে মোবাইল ফেজের স্রোতে নমুনাটি প্রবর্তন করা উচিত। পাম্পের চাপ 40 MPa এ বজায় রাখতে হবে। HPLC-এর কলামের মধ্য দিয়ে মোবাইল ফেজের এই স্ট্রিমটি প্রবাহিত হয়। তারপরে, নমুনার উপাদানগুলিও কলামের মধ্য দিয়ে যায়। যাইহোক, নমুনা উপাদান এবং কলামের ভিতরে শোষণকারীর মধ্যে মিথস্ক্রিয়ায় পার্থক্যের কারণে তাদের চলাচলের গতি একে অপরের থেকে আলাদা। আমরা এই শোষণকারীকে স্থির পর্যায় হিসাবে বলি কারণ এটি কলামের ভিতরে থাকে (চলছে না)। তারপর, কলামের শেষে, আমরা কলাম থেকে নির্গত নমুনা সংগ্রহ করতে পারি, এর ফলে, আমরা নমুনার উপাদানগুলি আলাদাভাবে সংগ্রহ করতে পারি।
দ্রুত HPLC কি?
সম্প্রতি, শেরিং লাঙ্গল গবেষণা ইনস্টিটিউটের গবেষণা বিজ্ঞানীরা একটি দ্রুত HPLC কৌশল তৈরি করেছেন যা HPLC-এর একটি উন্নত সংস্করণ কারণ এটি মিশ্রণ থেকে যৌগগুলিকে আরও দ্রুত পৃথক করার অনুমতি দেয়৷এছাড়াও, দ্রুত HPLC নামে পরিচিত, এই কৌশলটি একটি 2.7um ফিউজড কোর সিলিকা কণা ব্যবহার করে যা একটি কঠিন সিলিকা কণার উপর 0.5um ছিদ্রযুক্ত সিলিকা ফিউজ করে তৈরি করা হয়। এই স্বতন্ত্রভাবে তৈরি কণাগুলি পৃথকীকরণের প্রক্রিয়াটিকে খুব দ্রুত করে তোলে এবং তাও আমরা HPLC-তে যা ব্যবহার করি তার চেয়ে কম ব্যাকপ্রেশারে৷
চিত্র 02: FPLC যন্ত্রপাতি
দ্রুত HPLC UPLC-এর সাথে তুলনীয় ফলাফল পায়, কিন্তু বিজ্ঞানীরা বিবেচনা করেন যে এই কৌশলটি উচ্চতর কারণ এতে খুব ব্যয়বহুল অতি উচ্চ চাপের সরঞ্জামের প্রয়োজন হয় না। কী দারুণ ব্যাপার হল দ্রুত HPLC-এর জন্য কোনো নতুন ল্যাবরেটরি প্রোটোকলের প্রয়োজন হয় না৷
HPLC এবং দ্রুত HPLC-এর মধ্যে পার্থক্য কী?
HPLC হল হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি এবং দ্রুত HPLC হল হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফির একটি উন্নত রূপ।HPLC এবং দ্রুত HPLC এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে আমরা HPLC এর জন্য যে পাম্পের চাপ ব্যবহার করি তা প্রায় 40 MPa। যেখানে, দ্রুত HPLC-এর জন্য পাম্পের চাপ প্রায় 3-5 MPa। উপরন্তু, আমরা HPLC কৌশল ব্যবহার করে বিভিন্ন যৌগ যেমন অ্যামিনো অ্যাসিড, নিউক্লিক অ্যাসিড, কার্বোহাইড্রেট, স্টেরয়েড, অ্যান্টিবায়োটিক এবং হাইড্রোকার্বনকে আলাদা করতে পারি যখন দ্রুত HPLC কৌশলটি প্রধানত প্রোটিন আলাদা করার জন্য ব্যবহৃত হয়৷
নিচের ইনফোগ্রাফিক HPLC এবং দ্রুত HPLC-এর মধ্যে পার্থক্য সম্পর্কে আরও তথ্য উপস্থাপন করে।
সারাংশ – HPLC বনাম ফাস্ট HPLC
HPLC হল তরল ক্রোমাটোগ্রাফির একটি কৌশল যা সারা বিশ্বে খুব জনপ্রিয় হয়ে উঠেছে। ফাস্ট এইচপিএলসি এইচপিএলসি-র একটি নতুন সংস্করণ, শেরিং প্লো ইনস্টিটিউটের গবেষণা বিজ্ঞানীরা এই নতুন কৌশলটি তৈরি করেছেন।HPLC এবং দ্রুত HPLC-এর মধ্যে মূল পার্থক্যটি পাম্পের চাপের উপর নির্ভর করে যা আমরা আলাদা করার জন্য ব্যবহার করি। এটাই; HPLC এর জন্য আমরা যে পাম্পের চাপ ব্যবহার করি তা প্রায় 40 MPa। কিন্তু, দ্রুত HPLC-এর জন্য পাম্পের চাপ প্রায় 3-5 MPa৷
