মূল পার্থক্য – HPLC বনাম HPTLC
HPLC এবং HPTLC-এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে HPLC একটি নমুনায় উপাদানগুলির পরিমাণগত বিভাজনের অনুমতি দেয় যেখানে HPTLC একটি নমুনায় উপাদানগুলির পরিমাণগত বিভাজনের অনুমতি দেয় না৷
ক্রোমাটোগ্রাফি হল একটি ভৌত বিভাজন পদ্ধতি যা মিশ্রণের উপাদানগুলিকে আলাদা করতে এবং সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়। HPLC এবং HPTLC উভয়ই ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল। HPLC হল উচ্চ কর্মক্ষমতা তরল ক্রোমাটোগ্রাফি। HPTLC হল উচ্চ কার্যক্ষমতার পাতলা স্তরের ক্রোমাটোগ্রাফি৷
HPLC কি?
HPLC হল উচ্চ-কার্যক্ষমতা সম্পন্ন তরল ক্রোমাটোগ্রাফি। এটি একটি বিশ্লেষণাত্মক কৌশল যা একটি মিশ্রণের উপাদানগুলিকে আলাদা করতে, সনাক্ত করতে এবং পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়।এই কৌশলে, নমুনা একটি উপযুক্ত দ্রাবক মধ্যে দ্রবীভূত করা হয়। তারপর নমুনা সহ দ্রাবক একটি প্রদত্ত চাপ সহ একটি পাম্পের মাধ্যমে পাস করা হয়। পাম্প কঠিন শোষণকারী উপাদান দিয়ে ভরা হয়। তারপর কিছু উপাদান শোষক উপাদানের সাথে দৃঢ়ভাবে আবদ্ধ হয় যেখানে অন্যান্য উপাদানগুলি আলগাভাবে আবদ্ধ হয়। এটি পাম্পের মাধ্যমে উপাদানগুলির বিভিন্ন প্রবাহের হার সৃষ্টি করে। অতএব, উপাদানগুলি সহজেই আলাদা করা যায়৷
চিত্র 01: একটি HPLC সিস্টেম
যে শোষণকারী উপাদান পাম্পটি পূরণ করে তাকে স্থির পর্যায় বলা হয়। দ্রবীভূত নমুনা সহ দ্রাবক মোবাইল ফেজ হিসাবে পরিচিত। এই কৌশলে ব্যবহৃত পাম্পকে কলাম বলা হয়। কলামটি একটি শোষণকারী উপাদান দিয়ে ভরা হয়, সাধারণত সিলিকা কণা। এই কণার আকার 2-50 μm থেকে পরিসীমা হতে পারে। বিচ্ছেদ প্রক্রিয়া মোবাইল ফেজের গঠন এবং সিস্টেমের তাপমাত্রা দ্বারা প্রভাবিত হয়।স্থির পর্যায় এবং নমুনার উপাদানগুলির মধ্যে মিথস্ক্রিয়াগুলি হাইড্রোফোবিক মিথস্ক্রিয়া, ডাইপোল-ডাইপোল মিথস্ক্রিয়া, আয়নিক বন্ধন ইত্যাদি হতে পারে।
HPLC-এর অপারেশন প্রেসার প্রথাগত লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফির তুলনায় যথেষ্ট বেশি। এটি প্রায় 50-350 বার অবস্থিত। তরল ক্রোমাটোগ্রাফি এবং HPLC-এর মধ্যে পার্থক্য হল যে তরল ক্রোমাটোগ্রাফিতে, নমুনাটি কলামের মধ্য দিয়ে গ্রাভিটির অধীনে পড়ে যেখানে, HPLC-তে, নমুনাটি কলামের মাধ্যমে চাপ দেওয়া হয়। প্রথাগত তরল ক্রোমাটোগ্রাফির তুলনায় কলামের আকার এবং শোষক কণাগুলিও খুব ছোট। যাইহোক, HPLC কৌশল দ্বারা প্রদত্ত রেজোলিউশন উচ্চতর।
HPTLC কি?
HPTLC হল উচ্চ কার্যক্ষমতার পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফি। এটি ঐতিহ্যবাহী TLC এর উন্নত এবং স্বয়ংক্রিয় রূপ। এই কৌশলটি অল্প সময়ের মধ্যে একটি দক্ষ রেজোলিউশন প্রদান করে। বিশ্লেষণের এই পদ্ধতিতে, নমুনা এবং একটি রেফারেন্স একই সময়ে বিশ্লেষণ করা যেতে পারে, যা নমুনাটিকে রেফারেন্সের সাথে তুলনা করার অনুমতি দেয়।এটি অন্যান্য ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশলগুলির তুলনায় একটি উন্নত বিশ্লেষণাত্মক নির্ভুলতা দেয়। বিশ্লেষণের জন্য সময় কম লাগে। কৌশলটি একটি কম খরচের কৌশল।
চিত্র 02: HPTLC ব্যবহার করে খাদ্য রং এর বিশ্লেষণ
এইচপিটিএলসি পদ্ধতিটি একটি সহজ প্রক্রিয়া, এবং নমুনা প্রস্তুতির ধাপটিও বাদ দেওয়া হয় (প্রথাগত টিএলসি-তে, নমুনা প্রস্তুতির ধাপটি আলাদা করার আগে অন্তর্ভুক্ত করা হয়। এই ধাপে পরিষ্কার করা এবং সমৃদ্ধকরণ জড়িত)। দ্রাবকটি কোনো প্রাক-চিকিৎসা ছাড়াই সরাসরি ব্যবহার করা যেতে পারে যদিও অন্যান্য ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশলগুলির জন্য প্রি-ট্রিটমেন্ট যেমন ডিগ্যাসিং, ফিল্টারেশন ইত্যাদির প্রয়োজন হয়।
HPTLC-তে ব্যবহৃত শোষণকারী উপাদান হল সিলিকা যার আকার খুব ছোট কণা। ঐতিহ্যগত TLC-তে, সিলিকার কণার আকার 5-20 μm যেখানে, HPTLC-তে, এটি 4-8 μm। নমুনাটি একটি আবেদনকারী ব্যবহার করে HPTLC প্লেটে প্রয়োগ করা হয়।এটি একটি অভিন্ন এবং নিরাপদ অ্যাপ্লিকেশন দেয়। তারপর প্লেটগুলি মোবাইল ফেজ সহ একটি চেম্বারে স্থাপন করা হয়। চেম্বারটি মোবাইল ফেজের বাষ্প দিয়ে পরিপূর্ণ হওয়া উচিত। HPTLC প্রক্রিয়ার পরে, স্থানান্তরিত দাগগুলি সনাক্ত করা যেতে পারে। প্লেটে দাগ সনাক্ত করার সময়, HPTLC কৌশল একটি উপযুক্ত UV অঞ্চল বা একটি আয়োডিন চেম্বার ব্যবহার করে।
HPLC এবং HPTLC এর মধ্যে পার্থক্য কী?
HPLC বনাম HPTLC |
|
| HPLC হল হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি৷ | HPTLC হল উচ্চ কার্যক্ষমতার পাতলা স্তরের ক্রোমাটোগ্রাফি৷ |
| কৌশল | |
| HPLC-এ, দ্রাবক সহ মোবাইল ফেজটি স্থির পর্যায়ে ভরা একটি কলামের মধ্য দিয়ে যায়। | HPTLC-তে, নমুনাটি একটি TLC প্লেটে দেখা যায় এবং মোবাইল ফেজ ধারণকারী একটি চেম্বারের ভিতরে স্থাপন করা হয়; তারপর নমুনাটিকে মোবাইল ফেজ সহ প্লেটের উপরের দিকে স্থানান্তরিত করার অনুমতি দেওয়া হয়৷ |
| পরিমাপ | |
| HPLC-তে, কলামের মাধ্যমে উপাদানগুলির প্রবাহের হারের মধ্যে পার্থক্যগুলি নমুনার উপাদানগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়৷ | HPTLC-তে, নমুনার প্রতিটি উপাদান দ্বারা ভ্রমণ করা দূরত্বের মধ্যে পার্থক্য নমুনার উপাদানগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়। |
| পরিমাণগত বিচ্ছেদ | |
| HPLC একটি নমুনায় উপাদানের পরিমাণগত বিভাজনের অনুমতি দেয়৷ | HPTLC একটি নমুনায় উপাদানের পরিমাণগত বিভাজনের অনুমতি দেয় না৷ |
সারাংশ – HPLC বনাম HPTLC
HPLC এবং HPTLC দুটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল। এইচপিএলসি এবং এইচপিটিএলসির মধ্যে মূল পার্থক্য হল যে এইচপিএলসি একটি নমুনায় উপাদানগুলির পরিমাণগত বিভাজনের অনুমতি দেয় যেখানে এইচপিটিএলসি একটি নমুনায় উপাদানগুলির পরিমাণগত বিভাজনের অনুমতি দেয় না৷
