HPLC এবং UPLC-এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল HPLC 5 মাইক্রোমিটারের আশেপাশে তাদের আকারের কণাগুলির বিশ্লেষণের অনুমতি দেয় যেখানে UPLC 2 মাইক্রোমিটারের কাছাকাছি অনেক ছোট কণার জন্য অনুমতি দেয়৷
HPLC এবং UPLC উভয়ই তরল ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশল যা একটি যৌগের উপাদানগুলিকে আলাদা করতে কার্যকর। HPLC এবং UPLC এর মধ্যে পার্থক্য জানতে, আমাদের প্রথমে HPLC কি তা জানতে হবে। এর কারণ হল UPLC হল HPLC-এর একটি বিশেষ সংস্করণ এবং আমরা HPLC কী তা জানলে আমরা সহজেই তা বুঝতে পারব।
HPLC কি?
HPLC শব্দটি উচ্চ কর্মক্ষমতা লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য দাঁড়িয়েছে।এটি এমন একটি কৌশল যা আমরা একটি যৌগের বিভিন্ন উপাদানকে আলাদা করতে ব্যবহার করতে পারি। এছাড়াও, এটি একটি মিশ্রণের উপাদান সনাক্তকরণ, পরিমাণ নির্ধারণ এবং পৃথক করার জন্য সর্বাধিক ব্যবহৃত কৌশল। এছাড়াও, এই কৌশলটি কলামের মধ্য দিয়ে দ্রাবকগুলিকে ধাক্কা দেওয়ার জন্য একটি উচ্চ চাপ ব্যবহার করে। তদ্ব্যতীত, HPLC এর প্রধান অ্যাপ্লিকেশনগুলি একটি যৌগের উপাদানগুলির বিশ্লেষণের জন্য জৈব রসায়নে রয়েছে। এটি অ্যামিনো অ্যাসিড, নিউক্লিক অ্যাসিড, প্রোটিন, হাইড্রোকার্বন, কীটনাশক, কার্বোহাইড্রেট, অ্যান্টিবায়োটিক, স্টেরয়েড এবং অন্যান্য অজৈব পদার্থের পৃথকীকরণ এবং সনাক্তকরণের একটি আদর্শ উপায়৷
চিত্র 01: একটি পরীক্ষাগারে HPLC সিস্টেম
সংক্ষেপে, এইচপিএলসি কৌশলটির পরিচালনার পদ্ধতিটি নিম্নরূপ। প্রথমত, আমাদের একটি পাম্প ব্যবহার করে বিচ্ছিন্ন অল্প পরিমাণে মোবাইল ফেজের স্রোতে নমুনাটি প্রবর্তন করা উচিত।পাম্পের চাপ 40 MPa এ বজায় রাখতে হবে। তারপরে, মোবাইল ফেজের এই স্ট্রীমটি HPLC-এর কলামের মধ্য দিয়ে প্রবাহিত হয়। এছাড়াও, নমুনার উপাদানগুলি কলামের মধ্য দিয়ে যায়। যাইহোক, তাদের চলাচলের গতি একে অপরের থেকে ভিন্ন। নমুনা উপাদান এবং কলামের ভিতরে শোষণকারীর মধ্যে মিথস্ক্রিয়ায় পার্থক্যের কারণে এই পার্থক্যটি দেখা দেয়। আমরা এই শোষণকারীকে স্থির পর্যায় হিসাবে বলি কারণ এটি কলামের ভিতরে থাকে (চলছে না)। দ্বিতীয়ত, কলামের শেষে, আমরা কলাম থেকে নির্গত নমুনা সংগ্রহ করতে পারি। সেখানে আমরা নমুনার প্রতিটি উপাদানের জন্য ধরে রাখার সময়ের পার্থক্য নির্ধারণ করতে পারি।
UPLC কি?
UPLC শব্দটি আল্ট্রা হাই-পারফরমেন্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য দাঁড়িয়েছে। এটি HPLC এর একটি বৈচিত্র, কিন্তু অপারেশন পদ্ধতি একই। যাইহোক, HPLC এর বিপরীতে, এই পদ্ধতিটি খুব ছোট কণাকে বিশ্লেষণ করতে দেয়, যেমন 2 মাইক্রোমিটার ছোট কণা।
চিত্র 02: একটি UPLC ডিভাইস
আরও, এটি একটি দ্রুত বিশ্লেষণ প্রদান করে। এই কৌশলে, আমরা কলামে নমুনা সন্নিবেশের জন্য 100 MPa পাম্প চাপ ব্যবহার করি। সুতরাং, এই উচ্চ চাপ নিশ্চিত করে যে পুরো নমুনাটি কলামে প্রবর্তিত হয়েছে। এইভাবে, এটি HPLC-এর তুলনায় খুবই দক্ষ৷
HPLC এবং UPLC এর মধ্যে পার্থক্য কী?
HPLC শব্দটি হাই পারফরমেন্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য দাঁড়িয়েছে যেখানে UPLC শব্দটি আল্ট্রা হাই পারফরমেন্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য দাঁড়িয়েছে। অতএব, UPLC কৌশলটি HPLC-এর একটি উন্নত সংস্করণ। সুতরাং, অপারেশন পদ্ধতি উভয় কৌশল জন্য একই. যাইহোক, UPLC HPLC এর তুলনায় বেশি দক্ষ কারণ এটি একটি উচ্চ পাম্প চাপ ব্যবহার করে; HPLC-এর জন্য পাম্পের চাপ 40 MPA এবং UPLC-এর জন্য 100 MPa। অতএব, এটি HPLC এবং UPLC এর মধ্যে একটি পার্থক্য।সর্বোপরি, HPLC এবং UPLC-এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল HPLC 5 মাইক্রোমিটারের আশেপাশে তাদের আকারের কণাগুলির বিশ্লেষণের অনুমতি দেয় যেখানে UPLC 2 মাইক্রোমিটারের কাছাকাছি অনেক ছোট কণার জন্য অনুমতি দেয়৷
সারাংশ – HPLC বনাম UPLC
UPLC হল HPLC এর একটি রূপ। সুতরাং, অপারেশন পদ্ধতি একই। কিন্তু, আমরা HPLC-এর তুলনায় UPLC-তে কিছু উন্নত বৈশিষ্ট্য খুঁজে পেতে পারি। অতএব, HPLC এবং UPLC এর মধ্যে কিছু পার্থক্য রয়েছে। যাইহোক, HPLC এবং UPLC এর মধ্যে মূল পার্থক্য হল HPLC 5 মাইক্রোমিটারের আশেপাশে তাদের আকারের কণাগুলির বিশ্লেষণের অনুমতি দেয় যেখানে UPLC 2 মাইক্রোমিটারের কাছাকাছি অনেক ছোট কণার জন্য অনুমতি দেয়৷
